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大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及意义
目的 探讨大麻素受体2(CB2)在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及其在癌痛产生和维持中的作用.方法 雌性SD大鼠42只,体重160～180g,随机分为5组:对照组(C组)、假手术组(S组)、骨癌痛组(BCP组)、DMSO(二甲基亚砜)组(D组)和CB2选择性拮抗剂AM630组(A组).采用右侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker256(4x10<'5>)乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛模型,于接种后第7d从S组和BCP组分别随机选取6只,同C组的大鼠一起处死取脊髓,采用免疫印迹技术观察脊髓CB2的表达,在接种后的第1、2及第3天按照分组D组和A组分别鞘内注射DMSO 0.15μl和溶于1%DMSO的AM630 15μg.分别于注射肿瘤前1d、注射后的第1、3、5、7、14、21d(T<,0-6>)测定机械痛阈和热痛阈.结果 免疫印迹显示C组大鼠脊髓基本没有CB2的表达,与C组及S组相比,BCP组接种后第7d脊髓CB2表达水平升高.鞘内注射AM630癌细胞后大鼠接种后肢提前出现机械痛觉过敏现象.结论 脊髓CB2参与大鼠胫骨癌痛的产生和维持.
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Ⅱ型大麻素受体抑制剂对纳米级钛颗粒诱导 Ana －1细胞影响的实验研究
目的：观察Ⅱ型大麻素受体（CB2）选择性抑制剂 AM630对纳米级钛（Ti）颗粒诱导下 Ana －1细胞的影响。方法实验分5组，即空白组、颗粒组（Ti 0．5 g／L）、颗粒＋AM63050 nmol／L（AM1）组、颗粒＋AM630100 nmol／L（AM2）组、颗粒＋AM630200 nmol／L（AM3）组。将 Ana －1细胞在不同浓度 AM630（50、100、200 nmol／L）中培养，采用 CCK －8法检测12、24、48 h 后细胞增殖活性，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组细胞培养液中肿瘤坏死因子α（TNF －α）、白细胞介素－1β（IL－1β）含量，采用蛋白质印迹法（Western Blotting）检测 TNF －α、IL －1β、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p －ERK）的表达水平。结果不同浓度的AM630在各时点对 Ana －1细胞增殖均无影响。颗粒组各时点 Ana－1细胞上清液中 TNF －α、IL －1β的含量与空白组相比明显升高，差异有统计学意义（P ＜0．01），并且随着时间的延长，炎症因子的含量递增；加入不同浓度AM630后，各时间点细胞上清液中 TNF －α、IL －1β的含量较颗粒组呈递减趋势，差异有统计学意义（P ＜0．05）。颗粒组 p －ERK 水平较空白组明显增加，而加入不同浓度 AM630后，p －ERK 水平逐渐降低，差异均具有统计学意义（P＜0．05或 P ＜0．01）。结论CB2选择性抑制剂 AM630能通过抑制 ERK 磷酸化表达水平来降低纳米级钛颗粒诱导的 Ana －1细胞炎性因子的表达。
