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NMDA受体亚基NR1的体外表达及功能检测
目的:体外表达NMDA受体亚基NR1 并了解其电生理学特性,探讨体外表达受体亚基的意义.方法:将克隆的NMDA受体亚基NR1 质粒DNA经体外转录成RNA,显微注射到爪蟾卵母细胞后进行受体表达,采用双电极电压钳位技术记录表达的NR1 亚基的激活电流.结果:注射NR1 亚基RNA的爪蟾卵母细胞能表达出具有电生理学功能的受体,其激活电流能被D-AP5 阻断等特性,说明该表达的NR1 亚基具有NMDA受体的功能.结论:爪蟾卵母细胞表达的NR1 亚基具有NMDA受体的生物学功能,爪蟾卵母细胞可以用于体外受体表达.
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离子通道门控动力学研究进展
1 导言 二十世纪五十年代初,Hodgkin和Huxley以乌贼大轴突为材料作生理实验,用电压钳位技术证实了跨膜电位决定于细胞膜的离子通透性,以及神经细胞的兴奋是由膜的离子通透性变化所引起的,这项工作是神经生物学发展史上的里程碑,但当时没有回答离子是如何通过细胞膜的,究竟是借助于膜上载体,还是膜内有特殊的通道?二十世纪七十年代中期,Neher和Sakrmann使用他们发明的一种特殊的膜片钳位实验技术(膜片钳技术),证实了细胞膜上离子通道的存在,阐明了单个离子通道的功能,Neher和Sakrmann也因此荣获一九九一年诺贝尔医学奖。