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滇越金线兰醇提物对胰岛素抵抗的HepG2细胞降血糖活性及其化学成分的UPLC-MS/MS研究
民间俗称“药王”的滇越金线兰对治疗糖尿病有很好的疗效,但其活性成分的系统分析还未见报道.本研究将滇越金线兰粗提物作用于胰岛素抵抗的HepG2细胞,可显著促进细胞的葡萄糖摄取.应用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)快速分析滇越金线兰中的化学成分,通过保留时间、质谱精确分子量和特征碎片推定出63种成分,包括黄酮类、三萜和脂肪族化合物,结合胰岛素抵抗的HepG2对提取物进行降血糖活性筛选,采用UPLC-MS/MS快速进行成分分析,证明是一种可行且可靠的分离和鉴定中药中活性成分的方法.
关键词： 降血糖活性 HepG2细胞 高效液相色谱串联质谱法 滇越金线兰 -
滇越金线兰活性部位降血糖、增敏胰岛素和抗氧化活性研究
采用高糖高脂饮食联合低剂量STZ诱导造成糖尿病大鼠模型,实验组大鼠分别灌胃给予滇越金线兰总膏和溶剂萃取法所得各极性部位,测定给药后大鼠血糖、胰岛素敏感性、抗氧化活性及NO水平等相关指标.胰腺切片,进行病理学检查.与模型组相比,乙酸乙酯部位给药组的随机血糖可见明显降低,从给药前402.66至226.26 mg/dl (P＜0.05),而且该组大鼠的体重值明显高于模型对照组,同时能提高胰岛素敏感性,改善高糖负荷以后的糖耐量;胰腺细胞形态较模型组有明显改善;同时SOD活性增加,NO含量均显著降低.表明滇越金线兰的乙酸乙酯部位是其降血糖的主要活性部位,其作用机制可能与改善胰岛素抵抗、增强机体抗氧化活性和降低血浆NO等机制有关.
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滇越金线兰化学成分研究
目的:研究滇越金线兰石油醚部位的化学成分.方法:采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及制备薄层方法对滇越金线兰石油醚部位进行分离、纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物的结构结果:从该植物石油醚萃取部位分得6个化合物,分别鉴定为:木栓酮(1)、Sorghumol (2)、5α,8α-过氧麦甾-22-烯-3β-醇(3)、硬脂酸(4)、十八烷(5)、表木栓醇(6).结论:其中,化合物1、2、4为首次从该植物中得到,化合物3、5、6为首次从开唇兰属植物中分离得到.
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滇越金线兰中2个丁酸衍生物对HepG2细胞胰岛素抵抗改善作用的实验研究
目的 建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,并用于评价滇越金线兰中2个丁酸衍生物对胰岛素敏感性的改善作用.方法 采用高糖高浓度胰岛素诱导HepG2细胞建立肝细胞胰岛素抵抗模型,研究滇越金线兰2个丁酸衍生物对胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖摄取和细胞活力的影响.结果 胰岛素浓度为10-7 mol·L-1时细胞的葡萄糖摄取量小,为合适的模型复制浓度.与模型组比较,2个丁酸衍生物都能显著增加胰岛素抵抗的HepG2细胞对葡萄糖的吸收,葡萄糖摄取量分别增加了76.7％和77.8％,半数有效浓度(EC5o)分别为9.372和10.854μmol·L-1,对胰岛素抵抗的HepG2细胞的葡萄糖摄取呈现较好的促进作用.结论 2个丁酸衍生物对胰岛素具有增敏活性,能有效促进胰岛素抵抗细胞对葡萄糖的摄取和利用.
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滇越金线兰对高脂饮食联合STZ诱导的大鼠血糖、血脂和肾功能的影响
目的:研究滇越金线兰等剂量的总膏及其各极性部位对高脂饮食联合STZ诱导的大鼠模型血糖、血脂和肾功能的影响.方法:对滇越金线兰的总膏用不同极性的溶剂萃取,得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位.测定总膏和各极性部位对高脂饮食联合STZ诱导的模型大鼠给药后血浆的总胆固醇(T℃)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酐(CRE)和尿素氮(BUN).肾脏切片,进行病理学检查.结果:滇越金线兰的乙酸乙酯部位(4 g/kg)可以显著降低模型大鼠的血糖、改善血脂代谢,减少肌酐和尿素氮.各给药部位对糖尿病并发的早期肾损害有改善作用.结论:乙酸乙酯部位为滇越金线兰降血糖、降血脂和改善糖尿病肾病并发症的主要活性部位.
