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基于均相时间分辨荧光技术(HTRF)的HSP90-HOP相互作用抑制剂活性测试方法的构建及其应用
热休克蛋白90 (HSP90)是细胞内大量表达的一类蛋白,其主要功能是辅助细胞内其他蛋白(客户蛋白)的成熟.HSP90的众多客户蛋白与肿瘤的发生发展有重要的关系,因此抑制HSP90的功能可以使这些癌症相关蛋白降解,从而诱导肿瘤细胞凋亡,达到治疗肿瘤的目的.HSP90在发挥功能时还需要与辅伴侣蛋白HOP相互作用,因此靶向HSP90-HOP的相互作用开展抑制剂研发成为抑制HSP90伴侣系统的新策略.本文基于均相时间分辨荧光技术(HTRF)构建了稳定的用于测试HSP90-HOP相互作用抑制剂活性的方法,并用该方法研究了HSP90 C-端五肽MEEVD及其突变肽段对HSP90-HOP相互作用的抑制活性,为新型HSP90-HOP相互作用抑制剂的筛选和发现提供了重要基础.
关键词： 热休克蛋白90 HOP 均相时间分辨荧光技术 蛋白-蛋白相互作用 -
大豆磷脂防治大鼠肝纤维化的实验研究
目的观察大豆磷脂(soybean phospholipid,SPL)治疗大鼠肝纤维化的疗效.方法采用复合病因诱导大鼠肝纤维化模型,应用大豆磷脂进行治疗,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝匀浆丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HOP).结果①肝纤维化模型组血清ALT、AST明显升高,大豆磷脂治疗组升高较少,两组之间有显著性差异(P<0.01).②肝纤维化模型组肝匀浆MDA显著升高,大豆磷脂组显著低于模型组(P<0.01),而与正常组相比无显著差异(P>0.05).③肝纤维化模型组肝匀浆HOP比大豆磷脂组高得多,两组之间有显著性差异(P<0.01).④肝组织行HE染色,观察到Control组肝小叶结构完整,无变形、坏死及纤维组织增生.Model组正常肝小叶被破坏,肝板排列紊乱,肝细胞中充满脂滴,可见到程度不等、范围不一的肝细胞坏死区.门脉区有大量增生的胶原纤维,向肝小叶内伸展,纤维组织相互环绕而成大量假小叶,纤维间隔较宽.SPL组这些改变明显较轻.结论SPL有保护肝细胞免受损伤的功能和抗脂质过氧化的作用及其抗肝纤维化的作用.
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枸杞延缓小鼠皮肤老化的实验研究
目的:探讨枸杞延缓皮肤老化作用及其作用机制.方法:昆明种小白鼠颈部注射D-半乳糖,复制亚急性衰老模型.用黄嘌呤氧化酶法测定皮肤SOD活力,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定皮肤MDA的量,用碱水解法测定皮肤HOP含量,用HE染色法观察皮肤组织形态学改变.结果:给药组小鼠皮肤SOD活性明显增加,MDA含量明显降低,胶原蛋白含量明显增加,皮肤组织形态学检查结果与衰老模型组比较显示真皮层成纤维细胞数量增加,胶原纤维排列紧密,排列较规则.结论:枸杞可以延缓皮肤老化,浓度低于20%时其作用随剂量增加而增强,当浓度高于20%时其延缓老化作用随剂量增大而减弱.
