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海洋硫酸多糖类药物聚甘古酯单克隆抗体的制备及其特性研究
目的制备和纯化聚甘古酯(911)单克隆抗体,为911药代动力学的免疫学方法的建立提供依据.方法用还原胺化法,制备911-BSA和911-HSA复合物,间接ELISA法检测抗体生成.以IsostripTM试剂盒测定抗体亚型,流式细胞仪测定DNA含量.结果获得了一株阳性杂交瘤细胞DD3,腹水效价可达1×105,其抗体亚型为IgG2a(κ),细胞株的DNA含量约为脾细胞和NS-1细胞之和,亲和力常数为2.0×108 L*mol-1.结论本实验制备了特异性针对911的单克隆抗体DD3,且与内源性多糖和褐藻酸无交叉反应,为911药代动力学的免疫学检测提供了依据.
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硫酸多糖电泳方法的研究
目的研究几种海洋硫酸多糖的电泳行为.方法采用醋酸纤维膜电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法,染色剂选用爱茜蓝.结果几种海洋硫酸多糖的醋酸纤维膜电泳均呈单一斑点,与标准肝素相比,几种海洋硫酸多糖的迁移值不同;在建立的PAGE电泳条件下肝素获得了很好的分离,几种海洋硫酸多糖的PAGE电泳区带均呈连续分布,并利用电泳图象扫描软件进行了相对分子量分布分析.结论醋酸纤维膜电泳法可用于海洋硫酸多糖的定性鉴别,PAGE法可用于海洋硫酸多糖相对分子量分布的测定.
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海洋硫酸多糖911免疫增强作用的探讨
分别观察了海洋硫酸多糖911对小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞增殖反应的影响,以及对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响.并应用911-FITC荧光探针对淋巴细胞和巨噬细胞进行了荧光染色,以寻找911的受体,探讨其免疫增强机制.结果表明,911的适宜剂量能较弱地刺激小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞增殖,明显促进Co-nA诱导的T淋巴细胞及LPS诱导的B淋巴细胞增殖,显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力,且免疫细胞均能染上911-FITC.说明911能增强机体的免疫力,起到免疫调节作用.且免疫细胞上存在911的受体.
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海洋硫酸多糖抗病毒作用机制和构效关系
近年来大量的研究表明,海洋硫酸多糖具备广泛的抗病毒活性,且抗病毒作用机制多样,并与其复杂的结构特性密切相关.海洋硫酸多糖的抗病毒作用机制及构效关系研究已成为人们关注的热点.本文对目前发现的海洋硫酸多糖抗病毒活性、作用机制及构效关系进行了综合阐述,以期为新型抗病毒硫酸多糖药物的研发提供指导和参考.
