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人甲状旁腺素(1-34)对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性影响
目的:研究外源性hPTH(1-34)对原代培养成骨细胞ALP活性影响.方法:新生大鼠头盖骨中取成骨细胞,改良Gomori氏钙钴法染色鉴定,磷酸苯二钠法测定ALP活性,RT-PCR检测ALP mRNA表达.结果:10-8 mol.L-1 hPTH(1-34)以48 h为一循环,在每一循环的前12 h作用于细胞时,可使成骨细胞ALP活性较对照组增加明显,hPTH(1-34) 48 h作用组,与对照相比细胞ALP活性无显著差异.hPTH(1-34) 12 h作用组,成骨细胞ALP mRNA表达高.结论:hPTH(1-34)刺激成骨细胞内ALP活性升高与给药方式及药物浓度有关,间歇性给药成骨细胞内ALP活性升高.
关键词： 人甲状旁腺素(1-34) 成骨细胞 碱性磷酸酶活性 -
人甲状旁腺素(1-34)的合成与聚乙二醇化修饰
目的合成人甲状旁腺素(1-34)[hPTH(1-34)]并进行聚乙二醇化修饰.方法应用固相多肽合成方法合成并经高效液相色谱纯化得hPTH(1-34),Cys-hPTH(1-34)和hPTH(1-34)-Cys-NH2.Cys-hPTH(1-34)和hPTH(1-34)-Cys-NH2在水溶液(pH 7～8)中分别与平均相对分子质量为5 000的单甲氧基马来酰亚胺基聚乙二醇(mPEG5000-MAL)反应,经高效液相色谱纯化得Cys(mPEG5000-MAL)-hPTH(1-34) 和 hPTH(1-34)-Cys(mPEG5000-MAL)-NH2.结果 hPTH(1-34),Cys(mPEG5000-MAL)-hPTH(1-34) 和 hPTH(1-34)-Cys(mPEG5000-MAL)-NH2的质谱和氨基酸组成分析结果均与理论值一致.hPTH(1-34)-Cys(mPEG5000-MAL)-NH2保持了较好的体外活性,Cys(mPEG5000-MAL)-hPTH(1-34)保持了较好的体内活性.结论采用一种简便的方法成功实现了对hPTH(1-34)的N端或C端的聚乙二醇化修饰.
关键词： 人甲状旁腺素(1-34) 聚乙二醇 聚乙二醇化修饰 骨质疏松症
