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ELISA法检测丙肝抗体原理及影响因素分析
丙型肝炎病毒是小的有包膜的单正股RNA 病毒,主要经输血和其他非肠道途径传播(如共用针头,血透析)等.HCV 的亚临床感染,临床上无自觉症状,而ALT不正常,是丙型肝炎的主要传染源.HCV 感染的主要特点就是慢性化的几率很高,感染过程很长.我国丙型肝炎感染率仅次于乙型肝炎.患急性丙型肝炎后约有55%～85%的患者可变成慢性丙型肝炎,其中5%～20%的患者20～25 年后可发展为肝硬化,肝硬化患者10年内30%发展为终末期肝病.丙型肝炎自然转阴率低,治疗效果差,病程迁延,且与肝硬化、肝癌等的发生及发展显著相关.丙型肝炎目前尚无有效疫苗,也没有有效的冶愈方法,因此控制丙型肝炎只能从传染源和传播途径入手,早期准确诊断.本院采用ELISA 法测HCV,酶联免疫吸附试验(ELISA)是免疫学检验的主要技术手段,ELISA 技术是利用酶的高效催化和放大作用与特异性抗原-抗体反应相结合而建立的一种标记免疫技术,具有高度的特异性和敏感性.因其操作简单、特异性强、成本低等特点,被广泛使用于手工操作.
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丙肝抗体假阳性检测中ELISA法应用
目的 探讨酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙肝抗体(HCV-Ab)过程中存在假阳性的原因及解决方法.方法 回 顾性统计分析了 36 例用 ELISA 方法检测的 HCV-Ab 弱阳性血清标本,再采用聚合酶链反应(PCR)方法定量检测 HCV-RNA 进行确证试验,确定 ELISA 方法的假阳性率,并分析影响 ELISA 方法出现假阳性的因素及其解决方法.结 果 ELISA 方法检测的 HCV-Ab 弱阳性血清标本用 PCR 法检测 HCV-RNA 复检后 28 例仍为阳性,8 例阴性,表明以 PCR 检测 HCV-RNA 方法为准,ELISA 法有 77.8%的真阳性率,有 22.2%的假阳性率.影响因素除了方法学、试剂盒本 身之外,还有标本处理、操作不当等多种因素.结论 多种因素可能会导致 ELISA 法检测丙肝抗体出现假阳性,除了 严格操作、做好质控外,对可疑假阳性的标本一定要认真复测,好采用 PCR 检测 HCV-RNA 进行确证.
