首页 > 文献资料
-
miRNA-138-5p通过靶向调控CCNE1抑制黑色素瘤细胞增殖
目的 研究miRNA-138-5p在黑色素瘤细胞增殖中的作用及其发挥作用的机制.方法 MTT法检测miRNA-138-5p转染后黑色素瘤细胞的增殖;Realtime PCR检测miRNA-138-5p转染后其靶基因CCNE1 mRNA水平的变化;Western blot检测miRNA-138-5p转染后CCNE1蛋白水平的变化;Luciferase Reporter试验检测miRNA-138-5p对CCNE13'非翻译区(3'UTR)及其突变的影响;MTT法检测共转染miRNA-138-5p和CCNE1对黑色素瘤细胞增殖的影响.结果 过表达miRNA-138-5p可抑制黑色素瘤细胞的增殖.CCNE1是miRNA-138-5p的一个功能性靶基因,转染miRNA-138-5p可以降低细胞中CCNE1的mRNA和蛋白水平.共转染miRNA-138-5p和CCNE1可以部分消除miRNA-138-5p对黑色素瘤细胞增殖的影响.结论 miRNA-138-5p通过其靶基因CCNE1在黑色素瘤细胞的增殖中发挥了重要的作用,miRNA-138-5p在黑色素瘤细胞中可能作为一个关键的药物靶点.
-
榄香烯对神经母细胞瘤增殖的抑制作用
目的 观察榄香烯对神经母细胞瘤增殖的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 培养SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株.采用MTT法测定榄香烯对SK-N-SH细胞的抑制率,应用实时qPCR和Western blotting法测定榄香烯对SK-N-SH细胞中神经元限制性沉默因子(REST)的调控作用,并进一步用实时qPCR检测SK-N-SH细胞中细胞周期相关基因CCND1和CCNE1的表达.结果 榄香烯对SK-N-SH细胞的增殖有明显的抑制作用(P=0.001 16),并呈时间和浓度依赖性;榄香烯下调REST mRNA (P=0.000 38)和蛋白表达(P=0.003 39),并且抑制细胞周期相关基因CCND1 mRNA表达(P=0.001 91)和CCNE1 mRNA表达(P=0.000 15).结论 榄香烯对神经母细胞瘤的增殖有抑制作用,并且抑制其REST和细胞周期相关基因CCND1和CCNE1的表达.
关键词： 榄香烯 神经母细胞瘤 神经元限制性沉默因子 CCND1 CCNE1 -
CCNE1基因表达状态在卵巢癌中的预后价值
目的:探讨CCNE1基因表达状态对卵巢癌总生存结果的影响及预后价值.方法:利用The Kaplan Meier plotter数据库中的卵巢癌患者生存资料及CCNE1基因表达资料,分析不同CCNE1基因表达状态下卵巢癌的总生存差异,探索CCNE1基因表达的预后价值.结果:共检出1656例卵巢癌患者用于终的生存分析,根据CCNE1基因表达状态,分为低表达组(1171例)和高表达组(485例),低表达组卵巢癌中位总生存时间为48.0个月,高表达组为37.4个月,差异有统计学意义(P=0.001),风险比HR=1.26,95％CI(1.10,1.44).结论:CCNE1基因高表达降低卵巢癌总生存,是不良预后因子.
-
miR-497靶向细胞周期蛋白E1抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖
目的 研究miR-497在宫颈癌HeLa细胞中对细胞周期蛋白E1 (CCNE1)的靶向作用及其对HeLa细胞增殖的影响.方法 构建pre-miR-497、CCNE1野生型(WT-CCNE1)和突变型(MT-CCNE1)真核表达载体,采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)验证pre-miR-497载体的有效性,采用MTT法检测miR-497对HeLa细胞增殖的影响,采用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR和Western blot法验证miR-497对CCNE1的靶向关系.结果 测序结果提示pcDNATM6.2-GW-pre-miR-497、pmirGLO-CCNE1野生型和突变型表达载体构建成功,qRT-PCR证明转染pre-miR-497的HeLa细胞miR-497的表达显著升高.MTT法结果显示转染pre-miR-497的HeLs细胞增殖活性显著低于阴性对照miR组(P＜0.05).此外,双萤光素酶法检测共转染pre-miR-497和WT-CCNE1的HeLa细胞,其萤光素酶活性显著低于对照组(P＜0.01),qRT-PCR及Western blot法也分别证实转染pre-miR-497的HeLa细胞其CCNE1的mRNA和蛋白水平显著下调(P＜0.05).结论 miR-497能够通过靶向CCNE1调控宫颈癌HeLa细胞的增殖活性.
