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四环素抗药性文献资料
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应用Red重组技术构建四环素抗性多基因串联表达载体
目的 构建一种四环素抗性的多基因串联表达载体.方法 设计同源臂引物,通过重叠延伸 PCR获取含四环素抗性基因的打靶序列,应用pKD46介导的Red重组系统,在DH5α内替换多基因串联表达载体pET-m28a( + )中的抗性基因序列;再利用同尾酶(isocaudarner)策略,将sfp和accA1两基因串联组合于pET-mt28a( + )中,并进行共表达鉴定.结果 获得了含四环素抗性的重组质粒pET-mt28a( + );构建了两基因串联重组质粒pET/sfp/accA1-mt28a( + ),且两基因能够在同一载体上协同表达.结论 成功构建了一种四环素抗性表达载体pET-mt28a( + ),并可介导多基因的协同表达,为红霉素合成通路在大肠杆菌中的重建奠定了基础.
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南京地区1999-2004年四环素高度耐药淋球菌tetM基因分型及流行研究
目的 了解南京地区四环素高度耐药淋球菌(TRNG)tetM基因的分子流行病学情况.方法 采用琼脂稀释法检测菌株是否为TRNG,采用纸片酸度定量法测定菌株是否产β-内酰胺酶.采用单管PCR方法对TRNG阳性菌株作tetM基因分型.结果 1999-2004年间南京地区804株淋球菌中共检出136株(16.92%)TRNG,β-内酰胺酶阳性的淋球菌(PPNG)为290株,所有TRNG中69.85%(95/136)为PPNG/TRNG,TRNG的阳性率逐年增高.tetM基因分型结果显示,荷兰变型为135株,美国变型仅1株.结论 南京地区流行的TRNG以荷兰型tetM基因为主(99.26%),美国型仅为偶发.
