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哈维弧菌抗体的制备及其在磁性免疫层析试纸条的应用
目的 建立快速检测哈维弧菌的免疫学方法.方法 以甲醛灭活的哈维弧菌菌体为免疫抗原,对新西兰大白兔进行免疫得到哈维弧菌多克隆抗体;将多克隆抗体用间接ELISA法对创伤弧菌、副溶血性弧菌等进行特异性检测;将哈维弧菌多克隆抗体与磁珠结合,并将多克隆抗体标记在磁珠上形成特异性磁纳米探针,再分别以哈维弧菌多克隆抗体和山羊抗兔IgG作为检测线T线和质控线C线,初步实现了双抗体夹心模式的磁性免疫层析试纸条,并对磁珠偶联抗体添加量进行优化.结果 经ELISA法检测,哈维弧菌多克隆抗体效价为1:80000;其特异性良好,即此多克隆抗体与不同致病类型的食源性致病菌无交叉反应;佳偶联抗体添加量为140μg;半定量检测时间为10 min,检测的准确性和灵敏度已达到优,通过单纯的肉眼观察,可实现5×104 CFU/ml哈维弧菌的检测.结论 成功制备高效价哈维弧菌多克隆抗体并与纳米磁性材料进行了结合,为深入研究哈维弧菌的免疫原性与免疫学快速检测方法提供了基础.
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中药黄芩对多重耐药哈维弧菌耐药性的逆转作用
目的 研究中药黄芩对多重耐药哈维弧菌的耐药逆转作用并初步探讨其作用机理.方法 以耐阿莫西林、呋喃唑酮和红霉素的哈维弧菌X12XC30为实验对象,用倍比稀释法测定黄芩对菌株X12XC30的亚抑菌浓度;以SDS为对照,采用影印培养法测定黄芩作用24 h和48 h的耐药逆转率;通过质粒凝胶电泳观察黄芩对该菌株质粒的消除情况.结果 黄芩对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为3.00％(24h)和4.33％(48 h);SDS对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为0.33％(24 h)和1.33％(48 h).结论 黄芩对多重耐药哈维弧菌有耐药逆转作用.
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哈维弧菌对水产动物的致病性及其噬菌体防控研究进展
哈维弧菌是一种海洋致病菌,可感染甲壳类、贝类和鱼类等多种水产动物,引发患病动物急性败血症、突眼和慢性皮肤溃疡等.一直以来多采用抗生素控制该病,然而耐药菌株的出现和抗生素在养殖动物体内的残留,已经严重威胁到消费者健康,欧盟等国家已经禁止使用抗生素预防水产养殖动物哈维弧菌病,因而亟待寻求新的生态友好型抗菌剂.噬菌体因其在治疗细菌性疾病方面的独特优势而受到广泛关注.本文拟就哈维弧菌的流行病学、致病机制、抗生素治疗存在的问题及其噬菌体治疗研究进展进行概述,以期为噬菌体防控水产养殖动物哈维弧菌病提供理论和技术依据.
