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  • 人层黏连蛋白α4链LG1-3组件的克隆及酵母表达

    作者:张艳宇;孙兆增;连继勤;朱世成;许金波;张玉静

    目的:利用巴斯德毕赤酵母表达系统获得重组的人层黏连蛋白LG1-3组件蛋白,为进一步研究LG1-3的结构和功能间的关系奠定基础.方法:利用RT-PCR从人胎盘组织总RNA中扩增LG1-3组件cDNA,并重组入pPICZαA,电转化入毕赤酵母GS115,利用甲醇诱导表达目的蛋白.结果和结论:获得了1 800 bp LG1-3组件cDNA,利用体外定点突变将SacⅠ酶切位点GAGCTC突变为GAGCGC,经SDS-PAGE和Western印迹检测到相对分子质量为67.48×103的LG1-3组件蛋白的表达.

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