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李氏5号方水提液对神经元游离钙浓度的影响
目的观察李氏5号方水提液(LQET)对神经元游离钙浓度的影响.方法取出生1天内的SD大鼠,分离培养海马神经元,用阿糖胞苷抑制胶质细胞生长,细胞培养到第9～12天进行细胞内钙荧光测定.用荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞45min,借助共聚焦显微镜钙成像技术测定在30mmol/L的KCl作用下,不同干扰因素下培养的海马神经元胞浆游离钙荧光强度.结果正常条件下培养的神经元,细胞内游离钙浓度为75.67±8.65nmol/L,LQET使细胞内游离钙浓度提高到126.35±9.35nmol/L,但仍在正常上限范围内;L-型钙通道阻断剂硝苯地平预处理24h,30mmol/L KCl激活的细胞游离钙浓度降低到40.65±5.65nmol/L,与正常对照组比较差异显著.LQET与硝苯地平共同预处理后细胞游离钙浓度降低到90.75±10.15nmol/L,与单纯LQET预处理组和单纯硝苯地平组比较差异显著.10μmol/L NMDA能明显增加细胞内钙荧光强度,且能在某一强度稳定,NMDA受体阻断剂MK-801可显著阻断这一效应.LQET预处理后,NMDA导致的胞浆钙荧光强度的增强效应明显降低,MK-801预处理后,LQET降低NMDA增强细胞内荧光的效应显著降低.结论 LQET能通过L-型钙通道和NMDA受体对神经元细胞内钙浓度进行双向调定.
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李氏5号方对D-半乳糖老化小鼠行为学、海马神经元超微结构和Nurr1表达的影响
D-半乳糖老化小鼠是研究脑老化的常用模型,表现在皮层神经元转录水平降低,RNA及蛋白质含量下降,神经细胞数目减少,小鼠水迷宫成绩下降等,与老龄动物的表现一致[1,2].我们以往的研究发现D-半乳糖老化小鼠表现学习、记忆功能减退,海马神经元存在明显的超微结构改变,NGF和NT-3的免疫反应阳性细胞数减少,并出现神经元凋亡.但这些改变可被APP(β-Amyloid Precursor Protein)17肽明显改善[2～5],提示D-半乳糖老化小鼠的脑神经元损伤可被药物干预.现本文报告李氏5号方水提液(广东高明脑病医疗医药研究院提供,粉剂,由龟甲、枸杞子、石菖蒲、核桃仁、当归、远志、红花等组成)对D-半乳糖老化小鼠的学习记忆功能、海马神经元超微结构和Nurr1的影响.
