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梅毒螺旋体抗体在诊断新生儿梅毒中的应用和讨论
目的:探讨梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)抗体在诊断新生儿梅毒中的应用.方法:分别用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、TP-ELISA和密螺旋体颗粒凝集实验(TPPA)法对84例确诊新生儿梅毒患者与100例健康新生儿血清进行检测.结果:三种检测梅毒螺旋体抗体方法的灵敏度分别为51.2％、98.8％和100％,相对而言,TRUST法不适合作为诊断新生儿梅毒的初筛试验.结论:TP-ELISA法灵敏度与特异性相对较高,操作简便易行,建议作为诊断新生儿梅毒的初筛试验;TPPA法由于操作繁琐复杂,可结合临床作为新生儿梅毒的确诊试验.
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酶联免疫吸附双抗原夹心法检测人畜布氏菌抗体的研究
目的为人畜布氏菌病血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的一种酶免疫试验技术.方法在制备高滴度布氏菌抗原辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上,应用酶联免疫吸附双抗原夹心法即双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)、试管凝集试验(SAT)及虎红平板凝集试验(RBPT)对从山西省布氏菌病疫区收集的布氏菌病患者、布氏菌感染羊、牛、猪以及健康人、羊、牛、猪共计290份血清进行对比检测.结果上述3种试验对健康人、羊、牛、猪共计140份血清检查均为阴性反应,用DAgS-ELISA对布氏菌感染人、羊、牛、猪共计150份血清检查,其阳性率分别为91.4%、74.6%、66.7%及66.7%,从总体而言,检查的特异性及敏感性,以DAgS-ELISA优于SAT及RBPT.结论双抗原夹心酶联免疫吸附试验检测人畜布氏菌抗体,不仅特异、敏感、简便,而且制备一种布氏菌抗原酶结合物及其冻干制品,可用于人及各种动物布氏菌抗体的检测,值得推广应用.
关键词： 布氏菌病 双抗原夹心酶联免疫吸附试验 抗体 -
EDTA-K2对双抗原夹心ELISA检测HIV抗体的影响
目的 探讨乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)对双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体的影响.方法 用HIV抗体阴性和阳性静脉血分别制备EDTA-K2浓度为1.5、2.5、5、10、15、20、25、30、35、40 mg/mL的抗凝血并留取无抗凝剂血,分别分离血浆和血清,测定各样本HIV抗体,读取吸光度(A)值,对A值与EDTA-K2浓度进行相关性分析;制备EDTA-K2终浓度分别为1.5、2.5、5、10 mg/mL的 HIV抗体阳性和阴性抗凝血各20份并留取无抗凝剂血,分别分离血浆和血清,平行测定各样本HIV抗体,血浆与血清样本进行配对t检验.结果 EDTA-K2浓度与HIV抗体阴性样本A值无相关关系 (P=0.933),与HIV抗体阳性样本A值呈明显负相关(P<0.01); 当EDTA-K2≥5 mg/mL时,HIV抗体阳性血浆样本A值明显低于血清样本(P<0.01),当EDTA-K2≤2.5 mg/mL时,血浆与血清样本A值比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 EDTA-K2对HIV抗体阴性样本测定无干扰;血浆EDTA-K2≤2.5 mg/mL时,对HIV抗体阳性样本测定无干扰,EDTA-K2≥5 mg/mL时,对HIV抗体阳性样本测定呈明显负干扰.
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双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性的影响
目的:探究双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测灵敏度及特异性的影响.方法:选取2016年5月～2017年4月我院进行手术和血液透析前抗-HCV检测的患者270例,经血液筛查(荧光定量PCR法)抗-HCV阳性12例,抗-HCV阴性258例,采用双抗原夹心酶联免疫吸附法(ELISA)和间接ELISA分别对270例患者血清进行抗-HCV检测.比较两种检测方法的特异性、灵敏度.结果:双抗原夹心ELISA法灵敏度、特异性均高于间接ELISA法(P＜0.05).结论:双抗原夹心酶联免疫吸附试验可提高丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性,可作为临床血液标本筛查首选方法.
关键词： 丙型肝炎 双抗原夹心酶联免疫吸附试验 间接酶联免疫吸附法 -
梅毒血清学检测方法临床应用比较
梅毒的病原体为梅毒螺旋体,因其透明不易染色,又称苍白螺旋体(treponema pallidum,TP)[1,2].近年来梅毒发病率在我国呈明显上升趋势,对早期梅毒诊断方法的发展和完善,有利于指导临床及时确诊和治疗,对于控制梅毒的蔓延有重要意义.目前,广泛应用于实验室筛查的试验主要为快速血浆反应素试验(RPR)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),两者均为非特异性梅毒螺旋体血清试验,敏感性和特异性差.酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(TPPA)为特异性梅毒螺旋体血清试验,对潜伏期梅毒和非特异性梅毒螺旋体血清试验阴性而临床高度怀疑为梅毒的患者,应采用特异性梅毒螺旋体血清试验,以提高梅毒的检出率.本文采用TRUST、ELISA和TPPA三种方法,同时对51例各期梅毒患者及56例非梅毒患者血清进行检测,为梅毒检测方法的选择提供参考.
