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成人及胚胎胰岛细胞联合移植治疗1型糖尿病一例报告
我们采用胚胎和成人胰岛细胞联合移植,成功治疗1例1 型糖尿病患者,现报告如下.
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血管紧张素Ⅱ对离体人胰岛细胞内游离Ca2+及cAMP的影响
目的 探讨血管紧张素Ⅱ对离体人胰岛细胞内游离Ca2+及cAMP的影响,通过体外实验了解血管紧张素Ⅱ影响胰岛细胞分泌功能的相关分子机制.方法 以血管紧张素Ⅱ作用于分离纯化的人胰岛细胞,检测细胞内游离Ca2+及cAMP的波动情况,以胰岛灌流实验,绘制胰岛素动态分泌曲线.结果 血管紧张素Ⅱ时胰岛β细胞分泌功能的影响呈先升后降双向性,血管紧张素Ⅱ使细胞内游离Ca2+浓度升高,细胞内cAMP的浓度随着血管紧张素Ⅱ浓度的升高而下降.以上作用可被血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂Losartan所逆转.结论 血管紧张素Ⅱ通过与胰岛β细胞表面血管紧张素Ⅱ受体结合,导致细胞内游离Ca2+及cAMP变化,从而影响胰岛素分泌.
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NAD(P)H氧化酶在血管紧张素Ⅱ损伤人胰岛细胞功能中的作用
目的 探讨分离纯化的人胰岛细胞是否表达NAD(P)H氧化酶亚基p22phox,通过体外实验了解该酶在血管紧张素Ⅱ损伤胰岛细胞功能中所起的作用.方法 对分离纯化后的胰岛分别进行p22phox亚基和胰岛素免疫荧光检测;使用化学发光法检测不同浓度血管紧张素Ⅱ、AT1受体拮抗剂及NAD(P)H氧化酶抑制剂干预下胰岛细胞胰岛素分泌功能.结果 免疫荧光标记胰岛p22phox亚基和胰岛素均呈强阳性;血管紧张素Ⅱ抑制高糖刺激下胰岛细胞胰岛素的分泌,使用AT1受体拮抗剂或者NAD(P)H氧化酶抑制剂能拮抗血管紧张素Ⅱ的抑制作用.结论 分离纯化的人胰岛细胞表达NAD(P)H氧化酶;血管紧张素Ⅱ可能通过激活细胞表面NAD(P)H氧化酶使胰岛细胞发生氧化应激,从而损伤胰岛细胞的分泌功能.
关键词： 人胰岛细胞 氧化应激 NAD(P)H氧化酶 血管紧张素Ⅱ -
试管法纯化人胰岛细胞的初步研究
目的探索用试管法初步建立纯化人胰岛细胞的方法.方法用胶原酶P两步法消化分离胰腺,用试管法通过不连续密度梯度HC-A-Ficoll纯化液纯化人胰岛细胞.通过DTZ染色,在倒置显微镜下计数胰岛细胞的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能.结果纯化后平均每个胰腺可获得(53 500±21 465)个胰岛细胞团,平均每克胰腺组织可获得胰岛细胞团(750±267),平均纯度为72.92%.纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖时胰岛素的释放量为低糖时的1.89倍(P＜0.01).结论建立了人胰岛细胞纯化的方法,纯化的胰岛细胞功能良好.
