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BDH2基因对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及机制
目的 探讨 β-羟丁酸脱氢酶2(BDH2)基因对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及其机制.方法 合成表达BDH2的慢病毒载体,构建稳定表达BDH2的肝癌细胞株HepG2-BDH2(实验组)和对照细胞株HepG2-Vector(对照组).RT-PCR检测两组细胞中BDH2 mRNA表达水平.采用CCK-8法检测两组肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验观察两组细胞的克隆形成能力.Western blot检测BDH2蛋白和Bcl-2细胞凋亡相关蛋白的表达.实验数据比较采用t检验.结果 实验组BDH2 mRNA表达量为(2.20±0.10)×10-3,明显高于对照组的(0.20±0.01)×10-3(t=34.95,P<0.05).实验组细胞培养3、4、5、6、7 d的A450值分别为0.55±0.20、0.73±0.02、1.26±0.12、1.62±0.14、2.19±0.12,明显低于对照组的0.70±0.06、1.13±0.08、1.77±0.15、2.45±0.12、3.02±0.15(t=-5.19,-11.34,-5.96,-10.35,-9.54;P<0.05).细胞生长曲线显示实验组肝癌细胞的增殖能力明显弱于对照组.平板克隆实验结果显示,实验组细胞克隆形成数目为(184±7)个,明显少于对照组的(429±15)个(t=-25.84,P<0.05).与对照组相比,实验组的BDH2、cleaved caspase-3蛋白表达明显升高,而Bcl-2蛋白表达明显降低.结论 BDH2 基因可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能是通过 Bcl-2 信号通路促进肝癌细胞的凋亡.