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HBx上调lncRNA-HEIH对肝癌细胞增殖的影响
目的 探讨HBx上调肝细胞癌(肝癌)中高表达的长链非编码RNA(lncRNA-HEIH)对肝癌细胞增殖的影响.方法 标本来源于2015年9月至2016年3月中山大学附属第三医院和中山大学附属肿瘤医院30例HBV相关性肝癌患者手术组织.所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定.其中男24例,女6例;年龄20~65岁,中位年龄52岁.采用RT-PCR检测30例患者肝癌组织及癌旁组织中HBx、lncRNA-HEIH mRNA的表达水平.构建稳定表达HBx的肝癌细胞系SMMC-7721-HBx及Bel-7404-HBx(实验细胞),及其对照细胞SMMC-7721-Vector和Bel-7404-Vector.RT-PCR及Western blot检测细胞株lncRNA-HEIH的表达.根据有否转染siRNA-HEIH,将实验细胞分别分为干扰组和非干扰组.MTT检测两组吸光度值(A490).实验数据比较采用t检验,lncRNA-HEIH与HBx表达相关性检验采用Pearson相关.结果 肝癌组织中HBx、lncRNA-HEIH mRNA表达量分别为0.91±0.04、0.93±0.05,明显高于癌旁组织的0.53±0.01、0.35±0.02(t=7.95,10.42;P<0.05).lncRNA-HEIH mRNA与HBx mRNA的表达水平呈正相关(r=0.840,P<0.05).实验细胞SMMC-7721-HBx和Bel-7404-HBx中lncRNA-HEIH表达量分别为1.05±0.22、1.20±0.17,明显高于对照细胞的0.45±0.10、0.50±0.12(t=5.69,3.78;P<0.05).SMMC-7721-HBx和Bel-7404-HBx干扰组48、72、96 h的A490分别为0.26±0.05、0.38±0.04、0.43±0.10和0.27±0.05、0.30±0.12、0.39±0.05,明显低于非干扰组的0.37±0.07、0.59±0.12、0.80±0.10和0.38±0.07、0.62±0.12、0.78±0.11(t=-5.72,-3.47,-3.82和-3.89,-5.57,-8.34;P<0.05).结论 lncRNA-HEIH高表达可能与HBV相关性肝癌发生有关,HBx基因可通过上调lncRNA-HEIH的表达参与HBx基因促进肝癌细胞增殖.
关键词： 肝肿瘤 HBx 长链非编码RNA-HEIH 细胞增殖
