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髓样细胞表达激发受体-1对急性坏死性胰腺炎大鼠继发感染的判断价值
目的 探讨髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠继发感染早期的表达变化及其判断价值.方法 24只雄性SD大鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组、ANP继发感染(SI)组.通过腹腔注射L-精氨酸、大肠杆菌建模.制模后24 h取血和腹水行细菌培养,测血清淀粉酶、C-反应蛋白(CRP)、TNF-α及TREM-1水平,胰腺组织常规病理检查,实时PCR和蛋白质印迹法检测胰腺组织TREM-1 mRNA和蛋白的表达.结果 ANP组和SI组的胰腺病理评分、血清淀粉酶水平均明显高于对照组,且SI组血和腹水细菌培养阳性率达100%,表明制模成功.SI组血CRP、TNF-α水平分别为(18.7±3.1)mg/L和(185.7±10.9)mg/L,与ANP组的(16.5±3.6)、(176.0±18.6)mg/L无显著差异.SI组的血清TREM-1水平、胰腺组织TREM-1 mRNA及蛋白表达量分别为(9.3±0.9)ng/ml、14.84.±3.45、316.2±59.2,均显著高于ANP组的(5.5±0.3)ng/ml、4.51±1.44、188.6±42.4(P值均<0.05).结论 血清TREM-1水平对急性胰腺炎继发感染早期具有一定的判断价值.
关键词： 胰腺炎 急性坏死性 髓样细胞表达激发受体-1 继发感染 -
大鼠髓样细胞表达激发受体-1/人IgG融合蛋白真核表达载体的构建表达与鉴定
目的 构建大鼠髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)/人lgG融合蛋白的真核表达载体,并在家蚕Bm细胞中实现稳定表达.方法 克隆大鼠TREM-1胞外段与人1gGFe段,片段连接后PCR扩增,再与病毒穿梭载体BAC1连接,基因克降,构建重组质粒.利用]杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)筛选重组杆状病毒,在Bm细胞中进行融合表达,并用Western blot法行蛋白鉴定.结果 重组质粒酶切测序正确,确认克隆载体构建成功.Western blot结果说明该蛋白样品可被抗大鼠TREM-1抗体特异性识别,证明该蛋白为TREM-1/IgG融合蛋白.结论 成功构建了大鼠TREM-1/IgG融合蛋白真核表达载体,并在Bm细胞中稳定表达.
关键词： 髓样细胞表达激发受体-1 重组质粒 杆状病毒 融合蛋白 -
髓样细胞表达激发受体-1在大鼠急性胰腺炎继发感染早期肺损伤时的表达
目的:探讨重症急性胰腺炎继发感染(SISAP)早期肺损伤时髓样细胞表达激发受体-1 (TREM-1)的表达变化.方法:24只大鼠随机分为对照组(C组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、SISAP组.通过腹腔注射L-精氨酸、大肠杆菌造模,24h后取血及腹水行细菌培养;测定血淀粉酶活性、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TREM-1表达变化;胰腺及肺组织进行病理学评分;Real-time PCR和Western Blot分别检测肺组织中TREM-1 mRNA和蛋白的表达.结果:血和腹水细菌培养阳性率:C组为0/8,SAP组为1/8,SISAP组为8/8;SAP组和SISAP组胰腺和肺组织病理评分及血淀粉酶活性均明显高于C组(P < 0.05),且SISAP组较SAP组增高;SAP组和SISAP组的CRP、TNF-α均明显高于C组(P < 0.05),但两组之间差异无统计学意义;血清TREM-1 ELISA检测显示:SAP组和SISAP组均明显高于C组(P < 0.05),且SISAP组较SAP组增高(P < 0.05);Real-time PCR和Western Blot分别检测肺组织TREM-1 mRNA及蛋白表达,结果与血清TREM-1 ELISA检测相似.结论:重症急性胰腺炎继发感染引起的早期肺损伤中TREM-1表达明显增高.
关键词： 急性胰腺炎 继发感染 髓样细胞表达激发受体-1 肺损伤
