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Snail基因沉默对胰腺癌PANC1细胞侵袭和增殖的影响
目的 观察Snail基因沉默后对胰腺癌PANC1细胞侵袭和增殖能力的影响.方法 构建针对Snail的小发卡RNA(shRNA-Snail)的慢病毒载体和不针对任何已知mRNA序列的shRNA(shRNA-NC)慢病毒载体,分别感染PANC1细胞,以未感染细胞作为对照组.应用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测Snail、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及E-钙黏素(E-cadherin)mRNA和蛋白的表达;Transwell小室检测细胞体外侵袭能力,CCK-8法检测细胞增殖能力.结果 与shRNA-NC组比较,shRNA-Snail组细胞Snail mRNA和蛋白表达水平显著下降[(0.27±0.02)比(0.92±0.03),(0.26±0.02)比(0.80±0.02)],α-SMA mRNA和蛋白表达水平亦显著下降[(0.33±0.04)比(0.97±0.07),(0.31±0.04)比(0.74±0.06)],E-cadherin mRNA和蛋白表达水平则显著升高[(1.57±0.45)比(0.95 ±0.08),(0.86±0.03)比(0.20± 0.03)],穿膜细胞数显著减少[(6.80±0.73)比(26.80±2.52)个/400倍视野],细胞增殖明显被抑制[(0.74±0.05)比(1.47±0.04)],差异均有统计学意义(P值均<0.01).shRNA-NC组与对照组细胞各指标的差异均无统计学意义.结论 沉默Snail基因表达可在一定程度上抑制胰腺癌PANC1细胞的侵袭和增殖能力.
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连接蛋白43与Snail在乳腺癌组织中的表达及意义
目的 观察乳腺癌组织中连接蛋白43(Cx43)与Snail的表达,探讨Cx43与Snail在乳腺癌发病中的作用.方法 分别应用SP免疫组织化学方法和Western blot法检测80例乳腺癌组织及相应癌旁正常乳腺组织中Cx43和Snail的表达,并进行相关性分析.结果 Cx43在80例乳腺癌组织及相应癌旁正常乳腺组织中阳性表达率分别为40.00%和95.00%,差异有显著性(P<0.01);Snail的阳性表达率分别为86.25%和20.00%,差异有显著性(P<0.01).Cx43阳性表达与Snail呈负相关(χ2=11.423,P<0.01,r=-0.353).Western blot结果显示:与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中Cx43表达明显减少,而Snail的表达明显增加.结论 乳腺癌组织中Cx43表达下调和Snail表达上调在乳腺癌的发生中发挥一定的作用.