首页 > 文献资料
-
CPP32在阿霉素诱导的胃癌耐药细胞的凋亡的作用
目的 探讨耐药细胞和药敏细胞中caspase-3 mRNA、蛋白的表达以及他们相互之间的关系,试图阐明caspase-3在诱导耐药细胞凋亡中的作用及意义.方法利用已有的胃癌耐药细胞系SGC7901/08,通过RT-PCR研究caspase-3的mRNA在细胞毒药物处理耐药细胞0h,24h及药敏细胞0h,6h时的表达,用Western-blot的方法讨论其蛋白在耐药细胞中0h,6h,24h,30h的表达和药敏细胞中0h,6h,24h的表达,DNAladder检测其特征性凋亡变化,MTT法检测细胞的存活率.结果耐药细胞在0h,24h和药敏细胞在0h,6h表达的caspase-3mRNA无显著性差异,蛋白表达在耐药细胞中在6h出现微量的表达,在30h时出现更小片断;药敏细胞在6h时出现小片断,在24h出现完全裂解.细胞DNA分析表明耐药细胞在30h出现典型的凋亡谱带;应用了caspase-3抑制剂后细胞的凋亡延迟.药敏细胞在6h出现典型的凋亡谱带,应用了抑制剂后也出现凋亡的延迟.结论提高耐药细胞的用药量仍然可以使耐药细胞出现凋亡,而且其凋亡的过程与耐药细胞相同,均有caspase-3的激活,而抑制了caspase-3的活性,凋亡的发生可被抑制或是延迟,其差别就在于耐药细胞需要较高的药物诱导浓度.耐药细胞与药敏细胞的凋亡机制从本质上并无显著的不同,其根本的差别可能在于凋亡发生前的诸多因素产生的差异.
-
caspase-3表达及其与卵巢上皮性肿瘤组织细胞凋亡和增殖的关系
目的:探讨caspase-3与卵巢上皮性肿瘤发生、发展的关系.方法:利用免疫组化(SP)法和TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术,检测112例卵巢上皮性肿瘤组织中caspase-3和PCNA的表达水平及细胞凋亡情况.结果:caspase-3在卵巢恶性肿瘤中的表达(44.4%),明显低于良性肿瘤(81.8%,P＜0.01);在低分化卵巢癌中的表达(61.5%),明显高于高分化卵巢癌(23.5%,P＜0.05);在晚期卵巢癌中的表达(57.9%),明显高于早期卵巢癌(24.0%,P＜0.05);在有淋巴结转移癌中的表达(56.4%).明显高于无淋巴结转移癌中的表达(33.3%.P＜0.05).凋亡指数与增殖指数呈正相关(r=0.467,P＜0.01),与caspase-3的表达呈正相关(r=0.597,P＜0.01).结论:caspase3与卵巢上皮性肿瘤的细胞凋亡密切相关,参与细胞凋亡的调节机制,在卵巢上皮性肿瘤恶变的过程中发挥作用,并与恶性程度关系密切,有可能成为卵巢癌预后评估的参考.
关键词： 卵巢肿瘤/病理学 脱噬作用 caspase类/代谢 -
低氧预处理对大鼠脑缺血再灌注B细胞淋巴瘤2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA表达的影响
目的:观察低氧预处理对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型B细胞淋巴瘤2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA表达的影响,探讨其脑保护作用及可能机制.方法:①实验于2004-10/2005-06在苏州大学附属第一医院神经内科完成.选用清洁级成年SD雄性大鼠55只,随机分为3组:假手术组,对照组(缺血再灌注组)和低氧预处理组.②采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,假手术组只手术不插线.低氧预处理组在低氧预处理后12 h制备脑缺血再灌注模型.③假手术组在缺血3 h再灌注24 h、对照组和低氧预处理组在缺血3 h再灌注3,6,12,24,48 h不同时间点,进行脑切片的苏木精-伊红染色、原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤2水平、原位杂交染法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA表达.结果:55只大鼠均进入结果分析.①假手术组无凋亡细胞,低氧预处理组的凋亡细胞较对照组明显减少(P＜0.05).②低氧预处理组大鼠缺血再灌注3 h可见B细胞淋巴瘤2阳性细胞数开始表达,再灌注24 h达高峰,缺血再灌注6,12,24,48 h均较对照组增高(101.40±2.78,68.20±1.45:137.92±2.41,81.34±2.28;172.21+2.89,103.12+2.61;105.68±12.67,60.12±1.47;P＜0.05).③低氧预处理组和对照组缺血再灌注3 h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA阳性细胞数的表达逐渐增加,至24 h达高峰;低氧预处理组缺血再灌注12,48 h阳性细胞数的表达均较对照组减少(45.96±5.02,85.48±7.88;33.84±4.67,56.31±7.02;P＜0.05).结论:低氧预处理的脑保护作用与其抑制神经细胞凋亡有关;而上调B细胞淋巴瘤2及下调半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA的表达,可能是实现保护作用、抑制凋亡的机制之一.
-
CPP32在耐药细胞中的活性及其意义
目的探讨耐药细胞和药敏细胞中caspase-3 mRNA、蛋白的表达及相互关系,试图阐明caspase-3在诱导耐药细胞凋亡中的作用.方法利用胃癌耐药细胞系SGC7901/08,通过RT-PCR研究caspase-3的mRNA在细胞毒药物处理耐药细胞0h,24h及药敏细胞0h,6h时的表达,用Western-blot检测其蛋白在耐药细胞中0h,6h,24h,30h的表达和药敏细胞中0h,6h,24h的表达,DNAladder检测其特征性凋亡,MTT法检测细胞的存活率.结果耐药细胞和药敏细胞在0h,24h表达的caspase-3mRNA无显著性差异,蛋白表达在耐药细胞中6h有微量表达,30h出现更小片断;药敏细胞在6h时出现小片断,24h完全裂解.细胞DNA分析表明耐药细胞30h出现典型的凋亡谱带;应用了caspase-3抑制剂后细胞凋亡延迟.药敏细胞6h出现典型的凋亡谱带,应用抑制剂后凋亡延迟.结论提高耐药细胞用药量仍可以使耐药细胞凋亡,其凋亡的过程与耐药细胞相同,均有caspase-3的激活,而抑制了caspase-3的活性,凋亡可被抑制或是延迟,其差别在于耐药细胞需要较高的药物诱导浓度.耐药细胞与药敏细胞的凋亡机制的差别可能在于凋亡发生前的诸多因素产生的差异.
