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四氯化碳诱导兔肝硬化模型的动态研究
目的:探索简便、经济的兔肝硬化造模方法,并观察造模过程中的肝脏功能和组织病理学变化.方法:兔24只,随机分为2组,实验组20只给予乙醇灌服,并sc CCl4,正常对照组4只给予正常饮水并以等量橄榄油代替CCl4 sc.每2 wk采集血样和小块肝组织,进行生化指标检测和肝脏Masson三色胶原染色病理学观察.结果:随着四氯化碳处理时间的延长,肝纤维化程度逐渐加重.与对照组相比,实验组8 wk后ALT值和AST值(ALT,1867.1±200.1 nkat/Lvs 883.5±116.7 nkat/L,P=0.01;AST,983.5±116.7 nkat/L vs 650.1±133.4 nkat/L,P=0.03)均显著升高,而GGT值(100.1±33.3 nkat/L vs366.7±50.1 nkat/L,P=0.01)显著降低;实验8 wk末观察到肝硬化的典型病理表现,可观察到假小叶的形成.结论:联合应用CCl4和乙醇可成功诱导兔肝硬化,该方法动物死亡率低、造模快、成功率高.
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小鼠肝硬化—肝癌上皮间质转化的研究
目的 通过建立动物模型,观察肝硬化及肝癌上皮间质转化过程.方法 建立小鼠肝硬化、肝癌动物模型,进行HE染色和免疫组化染色.结果 存活小鼠肝硬化诱导成功率100％,病死率30％.存活小鼠肝癌诱导成功率100％,病死率40％.在肝硬化和肝癌动物模型中,E-钙黏蛋白阳性表达率为46. 7％和7. 1％,β3整联蛋白阳性表达率为40. 0％和7. 1％,波形蛋白阳性表达率为13. 6％和40. 0％,纤维连接蛋白阳性表达率为20. 0％和57. 1％.结论 小鼠肝硬化和肝癌组织模型中,E-钙黏蛋白、β3整联蛋白的低表达和波形蛋白、纤维连接蛋白的高表达与肝硬化向肝癌的上皮间质转化过程有关,为临床检测的重要参照指标.
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CCl4诱导大鼠肝硬化模型方法的探讨
目的：探索 CCl4诱导大鼠肝硬化模型的方法。方法：取 Wistar 大鼠40只，随机分为对照组（10只）和模型组（30只）。模型组给予0.2 ml/100 g CCl4原液腹腔注射1次，其后给予40% CCl4豆油溶液0.3 ml/100 g 腹腔注射，每周注射2次。对照组给予相同浓度的豆油溶液腹腔注射。连续注射7周后腹主动脉采血，检测 SOD 及 MDA 的含量。摘取肝脏称重，计算脏器系数，切取部分肝脏固定于10%甲醛溶液急性组织病理学观察。结果：模型组体重无明显增长，肝脏表面有结节，且脏器系数明显高于对照组（P ﹤0.05），组织切片 HE 染色后可见假小叶，血中 MDA 含量明显升高，而 SOD 活性明显降低（P ﹤0.05）。模型组动物死亡8只，造模成功率为73.33%。结论：利用 CCl4诱导大鼠肝硬化的方法速度速，模型成功率高。
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骨髓间充质干细胞对小鼠肝硬化模型的作用研究
目的 探索小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养和其肝硬化模型的制备,以及两者之间的相互作用.方法 首先,提取小鼠骨髓,移至培养瓶中,根据全骨髓贴壁法的原理培养干细胞;然后,采用CC14为主的方法对小鼠进行肝硬化模型的制备;后,把培养成功的骨髓干细胞通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗造模成功的肝硬化小鼠,观察疗效.结果 根据多种单克隆抗体的表达,使用流式细胞仪进行鉴定,成功培养小鼠骨髓间充质干细胞;对造模小鼠肝脏组织进行病理切片,病理报告图示典型的肝硬化,证明造模成功;通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗肝硬化模型小鼠,后报告干细胞治疗的病理结果,肝硬化程度减轻,说明骨髓间充质干细胞具有一定的疗效.结论 自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化是有效的,但仍需要基础研究和大样本的临床数据.
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原位辅助性部分肝移植治疗门静脉高压症的实验研究
目的 在建立猪原位辅助性部分肝移植动物模型基础上,观察该手术对猪肝硬化门静脉高压症的初步治疗效果,为临床开展原位辅助性部分肝移植治疗肝硬化门静脉高压症提供理论及实验依据.方法 采用结扎胆总管的方法复制猪胆汁性肝硬化动物模型,建模时间为8周,建模成功6只.另取健康良种幼猪6只作为供体组,参照有关文献进行麻醉、供体手术及供肝修整.术前、术后当天及第7天观察门静脉压力、血胆红素和肝功能,同时用彩色B超检查门静脉大流速及流量.结果 肝移植术后5只受体猪存活.术后第7天彩超观察存活猪两肝门静脉血流动力学情况,发现移植肝门静脉血流比宿主肝门静脉血流增多,移植肝功能良好,移植肝回流通畅.BIL、ALT及AST等指标明显好转,术后第7天开腹测量门静脉压力与术前相比显著降低;术前(20.76±2.43)cmH2O,术中关腹前(17.6±2.33)cmH2O,术后第7天(14.7±2.25)cmH2O.结论 原位辅助性部分肝移植术能降低门静脉压力和提供一定肝功能支持,是一种较有希望的治疗肝硬化门静脉高压症的新方法.
关键词： 门静脉高压症 原位辅助性部分肝移植 肝硬化模型 -
不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗兔肝硬化模型效果比较
目的：探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)通过不同移植途径对治疗兔肝硬化模型疗效的差别。方法用四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射和乙醇喂养的方法建立肝硬化兔模型,将肝硬化模型随机分为肝硬化模型组(n=10)、肝动脉移植组(n=10)、耳静脉移植组(n=10)。取健康新西兰大耳兔骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓 BMSCs,然后通过3种途径分别进行移植并检测血清白蛋白、转氨酶；通过 H E染色观察肝硬化程度以及利用Western-Blotting 法检测血清白蛋白在肝脏中的表达。结果分别通过静脉组与动脉组移植 BMSCs 到兔肝硬化模型中,4周后发现移植组模型兔的肝功能均得到明显改善,血清白蛋白较肝硬化未移植组显著升高(P<0.05),转氨酶较肝硬化未移植组显著降低(P<0.05)。2种途径移植BMSCs对兔肝硬化的治疗效果有统计学差异(P<0.05)。结论 BMSCs 移植通过耳静脉和肝动脉治疗肝硬化兔4周后,肝功能都有明显的改善。但经肝动脉移植治疗效果明显优于经静脉移植治疗效果。
