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儿童再生障碍性贫血及骨髓增生异常综合征体内TCRδ基因重排的研究
目的：研究儿童再生障碍性贫血及骨髓增生异常综合征患儿体内TCRδ基因克隆性重排及在免疫抑制治疗后的变化规律。方法收集2010年8月至2013年7月收治的59例儿童再生障碍性贫血及39例儿童骨髓增生异常综合征骨髓标本，使用巢式PCR检测TCRδ基因重排。结果（1）再生障碍组59例共有6例（10.17%）TCRδ基因重排阳性，MDS-RCC组34例中6例（17.65%）阳性，5例MDS-JMML中无阳性。（2）再生障碍与骨髓增生异常综合征组TCRδ基因重排阳性率无统计学差异（P＞0.05）。（3）再生障碍组中1例首次初筛阳性患者复发后TCRδ基因重新转阳，骨髓增生异常综合征组中2例初筛阳性患者使用免疫抑制剂效差伴骨髓TCRδ基因重排持续阳性。结论儿童再生障碍性贫血及骨髓增生异常综合征中有部分患者可出现 TCRδ基因克隆性重排，监测克隆性重排可能应用于监测免疫抑制治疗效果。
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正常人外周血和胸腺T细胞中TCR DδX基因重排的特点
目的:分析正常人外周血和胸腺细胞中TCR DδX基因重排分布特点.方法:利用半巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞(PBMCs)、4例分选的外周血CD3+T细胞和7例正常人胸腺细胞DNA的TCR DδX基因与JδX、Dδ3和ΨJα重排的情况,从不同含量DNA的PCR分析,了解其重排分布频率.结果:TCR DδX分别与JδX、Dδ3和ΨJα的重排均可见于多数外周血T细胞和胸腺细胞中,对不同含量的DNA的PCR分析显示TCR DδX重排的分布频率在外周血和胸腺细胞有所不同.结论:TCR DδX-ΨJα的重排常见于成熟和未成熟T细胞中,而TCR DδX-Dδ3则在未成熟T细胞中多见.
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正常人T细胞和胸腺细胞中多种新的TCR δRec基因重排
利用巢式或半巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞(PBMC)、4例分选CD3+细胞和7例正常胸腺细胞DNA中TCR δRec区与Jδ1、Dδ3和ψJa重排的基因片段,分析正常人外周血T细胞和胸腺细胞中TCR δRec基因重排情况.克隆性PCR产物进一步进行核苷酸序列分析确定其重排位置.结果发现了4种新的TCR δRec重排,包括TCR δRec149321-Jδl、TCRδRec14982o-Jδ1、TCR δRec151657(Nx)-ψJa和TCRδRec153199-Jδ1等,其中以TCR δNx的重排多见,通过利用不同模板DNA的PCR分析发现δRec重排在外周血和胸腺细胞中有所不同.结果显示TCR δNx-Jδ1重排在成熟和不成熟T细胞发生频率均较高,而TCRδNx-Dδ3重排在不成熟T细胞中发生率较高.但所有重排均不表达于mRNA中.本研究结果为TCR δ基因重排的研究补充了一些新的数据.
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儿童急性淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链和T细胞受体δ基因分析
目的研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中免疫球蛋白重链(IgH)基因、T细胞受体δ(TCRδ)基因重排的发生率及其临床特征.方法88例儿童ALL采用套式聚合酶链反应(PCR)技术检测IgH、TCRδ重排,结合流式细胞仪(FCM)检测免疫表型和细胞形态学FAB分型.结果IgH基因重排28例,阳性率31.81%;TCRδ基因重排31例,阳性率35.23%.两者均表达者10例,阳性率11.36%.在73例B系ALL中IgH基因重排28例,阳性率38.36%,TCRδ表达25例,阳性率34.25%,两者均表达者10例,阳性率5.68%.在15例T系ALL中未检出IgH基因重排,仅5例为单纯表达TCRδ基因重排,阳性率33.33%.在B系ALL中IgH表达高水平与T系ALL中IgH未表达相比,(X2=13.74,P＜0.005),有显著性差异.88例儿童ALL中的85例获完全缓解(CR),缓解率96.6%,对其中5例患儿IgH基因重排PCR动态观察,结果分别在完全缓解(CR)15个月、18个月、20个月、24个月时转阴.结论(1)TCRδ基因重排在儿童ALL中为高表达,在B系与T系ALL中表达相比,(X2=1.07,P＞0.05),无显著性差异.(2)IgH、TCRδ基因重排是儿童急性淋巴细胞白血病的特异性基因重排,该项检测有助于ALL克隆性诊断和基因分型.(3)监测IgH、TCRδ基因重排对于儿童ALL临床治疗、预后判断及微小残留病变(MRD)的存在有重要价值.
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T-ALL中两种新的TCRδ基因重排δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1
目的分析T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞中TCRδ基因新的重排形式及其在正常人外周血和胸腺细胞中的分布情况.方法利用半巢式PCR扩增2例T-ALL、10例正常人外周血和7例正常人胸腺细胞DNA的TCRδ基因组片段,了解其重排情况,克隆性PCR产物进一步进行核苷酸序列分析确定重排位置,并进一步经RT-PCR检测其重排基因的表达情况.结果在2例T-ALL病人白血病细胞发现两种新的TCR δRec-Jδ1基因重排方式,称为δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1,该新的TCR δRec基因重排同时见于大多数正常人外周血和胸腺.RT-PCR显示该两种TCR δRec-Jδ1基因重排的产物可见于2例T-ALL中,而正常人为阴性. 结论本研究发现两种新的TCR δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1基因重排.该重排基因表达于T-ALL中,而正常人不表达该重排基因,提示该重排形式可能与T细胞白血病的形成有一定的关系.
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正常人外周血和胸腺T细胞中TCR δRec151051-Jδ1和δ Rec151298-J δ 1基因重排的分布特点
目的分析正常人外周血和胸腺细胞中TCR δRec151051-Jδ1和δRec151298-Jδ1基因重排分布特点.方法利用半巢式和巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞(PBMCs)、4例分选的外周血CD3+T细胞和7例正常人胸腺细胞DNA的TCR δRec基因与J δ 1、Dδ3和ψJα重排的基因片段,从不同含量DNA的PCR分析,了解其重排分布频率.结果 TCR δRec151051分别与Jδ1、Dδ3和ψJα的重排和TCR δRec151298-Dδ3重排见于大多数外周血T细胞和胸腺细胞中,而TCR δRec151298与Jδ1和ψJα的重排则多见于胸腺细胞中.对不同含量的DNA的PCR分析显示δRec重排的分布频率在外周血和胸腺细胞有所不同.结论 TCR δRec151051、TCR δRec151298与Jδ1、Dδ3和ψJα的重排均存在于多数正常人T细胞中,TCR δRec151051-Dδ3常见于成熟和未成熟T细胞中,而TCR δRec151298-J δ 1和TCR δRec151298-ψJα则主要见于未成熟T细胞中.
