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组织工程化三维支气管模型体外再造的实验研究
目的 以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,探索采用体外构建组织工程化三维支气管模型的可行性,为研究支气管上皮细胞和成纤维细胞相互作用提供模型.方法 将支气管上皮细胞和肺脏成纤维细胞在添加Matrigel的液态Ⅰ型胶原中共培养,应用静态拉仲系统体外构建支气管模型.通过大体观察、相差显微镜观察、HE染色和免疫组织化学染色(广谱CK等)的方法对细胞的生长情况及形成的三维组织结构进行鉴定.结果 在体外应用静态拉伸系统能构建出组织工程化三维支气管模型.大体观察可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下可以观察到网状结构的形成,细胞活性良好;HE染色表明了三维刚状结构的形成;免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin呈阳性.结论 体外成功构建出组织工程化三维支气管模型,种子细胞共培养可在支架材料中完成极性生长过程并形成网状结构.
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用MDCK细胞为种子细胞体外构建组织工程化肾小管片层的实验研究
目的 以MDCK细胞为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,采用组织工程技术体外构建组织工程化肾小管片层,观察不同浓度Matrigel以及静态拉伸作用对MDCK细胞在三维支架中极性重建并形成小管样结构的影响.方法 将培养的MDCK细胞与添加不同浓度Matrigel的液态Ⅰ型胶原混合,在12孔板内铸模形成MDCK细胞-胶原片层.通过相差显微镜、HE染色,免疫荧光染色等方法对细胞的生长情况及形成的三维肾小管结构进行比较和鉴定.在此实验的基础上,对片层施加静态托伸力,观察静态拉伸作用对细胞生长、小管样结构形成的影响.结果 随培养时间的延长,各实验组片层内的MDCK细胞逐渐增殖、黏附、聚集.单纯以胶原为支架材料的片层内MDCK形成囊腔状结构;添加Matrigel的胶原片层内MDCK细胞可形成管腔样结构,且低浓度Matrigel的胶原片层内细胞存活率高.静态拉伸作用能够刺激细胞的生长、管腔样结构的形成.结论 本研究应用组织工程技术,以MEDK细胞为种子细胞、添加Matrigel的液态Ⅰ型胶原为支架材料,培养过程中施加静态拉伸力,体外成功构建出组织工程化肾小管胶原组织片层,肾脏小管上皮细胞可在该支架材料中完成极性重建的自组装过程.
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冰敷后静态拉伸治疗官兵急性踝关节扭伤疗效观察
目的:观察冰敷后静态拉伸治疗官兵急性踝关节扭伤的临床疗效.方法:选择临床确诊的官兵急性踝关节扭伤45例,随机分为观察组23例和对照组22例;对照组采用常规制动、冰敷、加压包扎、抬高患肢等常见治疗,观察组采用冰敷后静态拉伸治疗,均治疗5天后进行疗效评定.结果:观察组治愈9例,占39.1%;显效13例,占56.5%;好转1例,占4.3%;总显效率95.6%.对照组痊愈5例,占22.7%;显效12例,占54.5%;好转5例,占22.7%;总显效率77.3%.观察组总显效率显著高于对照组(P<0.05).结论:冰敷后静态拉伸治疗急性踝关节扭伤的临床疗效优于传统常规治疗.
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静态拉伸与下肢肌力锻炼在老年平衡能力中的意义
背景:进入老龄化社会后,通过改善老年人的平衡能力来预防跌倒,减少骨折等意外伤害的发生已经受到了各方面的广泛重视。目的:设计适合老年人的静态拉伸和下肢肌力相结合的运动方案并借以研究其对老年人平衡能力的影响。方法:对28名符合入选标准的老年人进行为期3个月的静态拉伸和下肢肌力训练,3次/周,60 min/次。训练前后分别用 PRO-KIN 平衡仪进行睁、闭眼双脚站立静态平衡能力评估;用闭目原地踏步和反复坐起测试进行动态平衡能力和下肢肌力的评估。对比分析前后两次测试结果。结果与结论:在睁眼状态下,锻炼前后的压力中心的X轴平均坐标、运动椭圆面积差异均有非常显著性意义(P<0.01);左右方向平均运动速度差异有显著性意义(P<0.05);闭目原地踏步测试脚触线时间和反复坐起时间均差异有非常显著性意义(P<0.01)。结果表明,静态拉伸与下肢肌力锻炼相结合能够有效提高老年人的平衡能力,可作为预防老年人跌倒的有效锻炼方式。
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细胞密度对组织工程化三维支气管模型体外再造影响的研究
研究种子细胞接种密度对体外构建组织工程化三维支气管模型的影响,并筛选出适宜体外构建支气管模型的细胞密度.以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞,胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,将两种细胞按照6×104/ml、6×105/ml、6×106/ml和6×107/ml四个接种密度共培养,应用静态拉伸系统体外构建组织工程化三维支气管模型.通过宏观观察、相差显微镜观察和组织学检测的方法对模型中种子细胞的生长情况进行鉴定.结果表明:6×104/ml细胞密度未见到组织片层形成,其余三个细胞密度可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下观察6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层可以形成网状结构,6×107/ml细胞密度的组织片层结构疏松;HE染色证实6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层中有三维网状结构形成,免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin均呈阳性,前者的细胞活性较后者更好,而6×107/ml细胞密度组织片层基本丧失细胞活性.体外构建组织工程化三维支气管模型其种子细胞密度在6×105/ml至6×106/ml之间较为适宜.