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ID4、ZO-1基因甲基化定量检测在急性白血病诊断中的意义
目的 探讨ID4、ZO-1基因甲基化定量检测作为基因标志在急性白血病(acute leukemia,AL)中的意义.方法 采用硫化测序PCR (bisulfite sequencing PCR,BSP)法及甲基化特异性PCR(methylightion specific PCR,MSP)法检测AL中NB4细胞和健康供者骨髓(normal bone marrow,NBM)细胞的ID4、ZO-1基因的甲基化状况并进行分析.结果 BSP法检测ID4基因在AL NB4细胞中甲基化阳性率为86.0％,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(4.8％),差异有统计学意义(P＜0.05);ZO-1基因在AL NB4细胞系中甲基化阳性率为88.4％,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(1.9％),差异有统计学意义(P＜0.05).采用MSP法检测9种AL细胞系,ID4、ZO-1基因甲基化水平在淋系来源的细胞系高于髓系来源的细胞系.结论 ID4、ZO-1基因甲基化水平检测可作为新的AL基因标志物.
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辐射诱发胸腺淋巴瘤Kras基因的表达及其启动子甲基化
目的：研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤 Kras基因 mRNA和蛋白表达的变化，并检测其启动子 CpG岛甲基化状态，探讨辐射致癌的发生机制。方法：采用 X射线照射30只 BALB/c小鼠，建立胸腺淋巴瘤动物模型，取胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织，分别提取总 mRNA、合成 cDNA和总蛋白，采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和 Western blotting法分别检测Kras基因mRNA和蛋白表达水平，采用硫化测序 PCR （BSP）法检测Kras基因启动子CpG岛甲基化状态。结果：RT-PCR法检测，胸腺淋巴瘤 Kras基因 mRNA相对表达水平明显高于正常胸腺组织（P＜0.01）；Western blotting法检测，胸腺淋巴瘤Kras基因蛋白表达水平高于正常胸腺组织近1.41倍；BSP法检测，正常胸腺组织Kras基因启动子有4个CpG位点发生甲基化，而辐射诱发胸腺瘤 Kras基因启动子有1个CpG位点发生甲基化，呈去甲基化状态。结论：电离辐射可能通过Kras基因启动子去甲基化而引起Kras基因mRNA和蛋白表达水平改变，进而导致肿瘤的发生，其可能是辐射致癌的发生机制之一。
