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G 试验阳性血清通过干扰 Dectin-1的内在化表达抑制 ROS 依赖性杀伤白念珠菌
目的：探讨G试验阳性血清中游离β-1，3-D-葡聚糖干扰人嗜中性粒细胞Dectin-1所介导的氧依赖性杀伤白念珠菌的机制。方法激光共聚焦显微镜检测经β-1，3-D-葡聚糖酶预处理前后的白念珠菌孢子作用下，人嗜中性粒细胞内Dectin-1表达分布的变化及与活性氧簇（ reactive oxy-gen species， ROS）的共定位关系；进一步分析Dectin-1的阻断对白念珠菌诱导下胞内ROS生成的影响；流式细胞术检测G试验阳性血清中游离的β-1，3-D-葡聚糖对白念珠菌诱导下人嗜中性粒细胞内Dectin-1和ROS表达水平的影响。结果在白念珠菌作用下，人嗜中性粒细胞内诱导性表达的Dec-tin-1主要被募集到内吞的孢子表面，且与ROS的产生具有一定的共定位关系。然而，经β-1，3-D-葡聚糖酶预处理后，胞内则未见Dectin-1的明显表达；当Dectin-1被其功能性抗体（5μg/ml）阻断后，白念珠菌诱导胞内ROS的表达与阻断前相比显著降低（LSD-t检验，P＜0．01）；经G试验阳性血清预处理的人嗜中性粒细胞中，白念珠菌诱导下胞内Dectin-1和ROS的表达水平均显著低于单一的白念珠菌作用组（LSD-t检验， P＜0．01）；线性回归分析提示G试验阳性血清中游离β-1，3-D-葡聚糖浓度分别与Dectin-1及ROS表达水平的抑制部分呈显著的剂量依存关系（ Dectin-1，R2＝0．702，P＜0．01；ROS，R2＝0．588，P＜0．01）。结论 G试验阳性血清中的游离β-1，3-D-葡聚糖可通过干扰人嗜中性粒细胞Dectin-1内在化表达的方式抑制ROS依赖性杀伤内吞的白念珠菌孢子。
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Dectin-1内在化表达介导氧依赖性方式杀伤白色念珠菌
目的 探讨Dectin-1介导人嗜中性粒细胞以氧依赖性方式杀伤调理吞噬后白色念珠菌孢子的机制.方法 在白色念珠菌孢子作用前后,流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测人嗜中性粒细胞中Dectin-1的表达率及表达部位；并通过Dectin-1阻断试验分析嗜中性粒细胞中Dectin-1的表达与胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的产生及对白色念珠菌孢子杀伤的相关性.结果 在白色念珠菌孢子刺激30或60 min后,细胞内Dectin-1的表达率明显上调(0min,8.32％；30 min,16.82％;60 min,23.88％.与0min相比,P均＜0.01),且Dectin-1与ROS在胞内的表达均被募集到吞噬的白色念珠菌孢子表面.Dectin-1的阻断分别与ROS峰值的抑制(R2=0.306,P＜0.01)及白色念珠菌杀伤率的降低(R2=0.251,P＜0.01)呈剂量依存关系.结论 Dectin-1可通过内在化的表达模式介导人嗜中性粒细胞以ROS依赖性方式杀伤调理吞噬的白色念珠菌孢子.
