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抑制性消减杂交技术筛选重组IFNβ下调HepG2细胞靶基因
目的 利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建重组干扰素β(IFNβ)刺激人肝癌细胞系HepG2差异表达基因的cDNA消减文库,筛选IFNβ下调HepG2相关基因.方法 重组IFNβ 2000 U/ml刺激对数生长期HepG2细胞,以生理盐水作用的HepG2细胞为阴性对照;制备细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa Ⅰ酶切后将实验组cDNA分成两份,分别与两种不同的接头连接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析.结果成功构建重组IFNβ刺激HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库.文库扩增后,得到58个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200～1000 bp插入片段.随机挑选其中35个插入片段测序,并通过生物信息学分析,结果 共获得12种编码基因.结论 应用SSH技术成功构建了IFNβ刺激HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库,为进一步了解IFNβ在肝细胞内的免疫调节机制提供了依据.
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hCG注射日孕酮升高对体外受精-胚胎移植的影响
体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）过程中，在卵泡晚期人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射日孕酮水平升高是否与妊娠结局有相关性，尚无统一的意见。针对这一问题，基于国内外的研究成果围绕hCG注射日孕酮水平升高对IVF结局的影响，首先阐明孕酮主要由卵泡颗粒细胞产生，而促排卵方案中多种因素可导致孕酮水平升高。其次从激素环境、卵母细胞的质量及子宫内膜的容受性方面综述了孕酮升高影响IVF结局的机制。然后，系统阐述了孕酮升高对IVF结局影响的实证研究，并进一步分析孕酮通过改变子宫内膜容受性而终降低妊娠率。后，在这些研究基础上，指导临床医生优化促排卵方案或移植方案，尽可能地改善实验室及临床结局，也为下一步研究微刺激/自然周期IVF提供理论依据。
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高血压病突然停药致脑干出血
[病例] 男,30岁.主因突发昏迷40分钟急诊入院.患者于40分钟前在家中突然出现头痛、头晕,当时无呕吐;测血压为180/110 mmHg.约3分钟后昏迷,呼之不应.家人急呼"120"出诊,现场予20%甘露醇250 ml快速静脉滴注,25%硫酸镁10 ml肌内注射后快速转送入院,途中患者频繁呕吐咖啡样物质,并出现呼吸停止,紧急予气管插管辅助呼吸.
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哮喘治疗中糖皮质激素减量失败的预测因素分析
目的探讨哮喘治疗中吸入糖皮质激素(ICS)减量的客观指标.方法研究对象为符合入选标准且得到良好临床控制的19例哮喘患者.在减量前和减量后的每个月分别行组胺支气管激发试验、肺功能和痰炎性细胞检查.ICS减量参照哮喘严重度进行.结果减量前气道高反应性(AHR)患者激素减量失败的危险性明显增加(P=0.034).减量后哮喘加重时痰嗜酸性粒细胞百分数显著增加(P=0.003).而肺功能在减量前和加重时无显著差异.结论气道高反应性和痰嗜酸性粒细胞百分数增加是减量失败的强烈预测因素.
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两种短效曲普瑞林降调节方案诱发排卵效果比较
目的:比较两种剂量短效曲普瑞林降调节方案促排卵的效果.方法:将接受超促排卵降调节长方案的178例患者分为两组,A组86例,从前一月经周期的第21天始,每天皮下注射短效曲普瑞林0.1mg 10～21天降调节后,减量至0.05mg/d直至注射HCG日;B组92例,从前一月经周期第21天始隔日1次皮下注射短效曲普瑞林0.1mg 10～21天降调节后减量至0.05mg/d直至注射HCG日,比较两组的获卵率、优质胚胎、胚胎冷冻率、着床率、妊娠率、继续妊娠率、激素水平等.结果:A组获卵率、优质胚胎数、优质胚胎率、冻胚率较B组高(P<0.01);着床率、临床妊娠率、继续妊娠率A组较B组有增高趋势.结论:月经周期第21天始,皮下注射短效曲普瑞林0.1mg/d降调节效果好.
