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p57KIP2表达结合流式细胞术分析对葡萄胎的辅助诊断价值
目的 研究父源性印迹基因p57KIP2蛋白表达结合DNA倍体分析对葡萄胎的辅助诊断意义.方法 收集32例具有DNA多态性遗传学分析资料的胎盘绒毛水肿病例,以遗传学分析结果作为葡萄胎的诊断依据.全部病例进行常规组织学检查、p57KIP2免疫组织化学染色(EnVision法)及流式细胞术DNA倍体分析,采用双盲法与遗传学分析结果对照.结果 32例绒毛水肿病例的遗传学分析证明,21例为完全性葡萄胎(CHM),7例为部分性葡萄胎(PHM),4例为水肿性流产.CHM p57KIP2免疫组织化学表达的阴性率为95.2%(20/21).非CHM的p57KIP2免疫组织化学全部阳性(11/11).p57KIP2免疫组织化学与DNA多态性分析结果的吻合率为96.9%(31/32).流式细胞术分析发现,7例PHM均为三倍体核型;21例CHM中有14例为二倍体,7例为四倍体;4例水肿性流产均为二倍体或近二倍体.结论 p57KIP2免疫组织化学阴性是CHM的可靠标志物.p57KIP2免疫组织化学结合流式细胞倍体分析可明确区分三种胎盘绒毛水肿性病变.p57KIP2免疫组织化学阴性支持CHM,p57KIP2免疫组织化学阳性且为三倍体为PHM,p57KIP2阳性且为二倍体支持水肿性流产.
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热量限制对人二倍体成纤维细胞衰老相关基因表达的影响
目的 观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响.方法 应用RT-PCR和Western blot的方法,对含低浓度(3.0 mmol/L)、高浓度(22.5 mmol/L)葡萄糖和正常对照组(含5.0 mmol/L葡萄糖)培养条件下的IMR-90细胞衰老相关基因p16、p21和p53的mRNA和蛋白表达水平进行分析.结果 与对照组和高糖培养条件下的早期和晚期细胞相比较,低浓度葡萄糖培养条件下的早期和晚期细胞p16和p21在mRNA水平均显著下降(P＜0.05);低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养组晚期细胞p16蛋白水平分别为4.2、7.4、9.7,比各自早期细胞表达(0.6、1.0、1.8)增加5～7倍;低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养早期细胞和低糖培养晚期细胞p21蛋白水平差异无统计学意义,分别为1.1、1.0、1.3、0.9,但与对照组和高糖培养晚期细胞p21蛋白水平(3.1、4.2)相比较则降低3～4倍;各组培养条件下的早期和晚期细胞中p53表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 各组晚期细胞比各自早期细胞p16基因表达增高;对照组和高糖培养条件下的晚期细胞比各自早期细胞p21基因表达增高;低浓度葡萄糖培养延缓IMR-90细胞衰老并伴有p16和p21基因表达下调;p53基因可能不是IMR-90细胞复制衰老主要调节因子.
