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疾病体外检测和诊断技术的新发展
从全球范围来看,疾病体外检测、诊断试剂的需求在不断增长,年增长率达到5.5％;我国诊断试剂的市场增长率达到近20％[1].特异、敏感和快速的疾病体外检测和诊断方法是预防和治疗疾病的重要手段和前提.一些新的检测技术和平台正逐渐应用于疾病的检测和诊断,引起了越来越多的关注.随着纳米技术( nanotechnology)和材料的兴起与蓬勃发展,依赖纳米材料和技术的新的疾病诊断方法的研究正在成为疾病检测和诊断的热点;基于纳米材料和技术的新的疾病诊断方法可能成为新一代疾病体外检测和诊断方法而受到世界各国的广泛重视.其他像芯片技术(microarray chip)、微流控技术( microfluidic device)和生物传感器( biosensor)等也开始应用于疾病的体外检测,这些新技术相互结合为新的疾病检测方法研发提供了更多的选择.
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微流控芯片电泳在快速分离尿蛋白中的临床应用价值
目的探讨并建立微流控芯片的电泳分离方法,用于快速分离尿蛋白.方法利用照相平板湿蚀刻法在5 cm×5 cm×0.1 cm石英玻片上,刻制管道宽度为70 μm、深度约40 μm的十字形电泳泳道,以500 V为进样电压、2 000～2 500 V为分离电压、pH 10.5的75 mmol/L 硼酸缓冲液为电泳液分离尿蛋白. 结果在2～3 min完成电泳,纯牛白蛋白、人运铁蛋白、人IgG均可得到单一分离峰,其混合样品亦可得到较好分离.在38例尿蛋白阳性患者中,用该法检测发现溢出性蛋白尿3例、选择性蛋白尿9例、非选择性蛋白尿26例,8例健康对照未检出蛋白峰.结论本法具有快速、简便、检测成本低的特点,依据电荷和分子量的不同,可将蛋白尿初步分为溢出性蛋白尿、选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿,有利于临床的诊断和预后判断,有较好的应用前景.
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微流控技术在口岸呼吸道传染病检测中的应用
目的 呼吸道感染是全球关注的公共卫生问题,随着国际贸易的快速发展,在人流和物流集中的国境口岸传播风险极高.因此当务之急是口岸卫生检疫部门寻找一种多通量、检测速度快、特异性高和准确性好的呼吸道病原体检测技术.方法 目前呼吸道病原体检测技术主要有微生物的分离培养、血清免疫学和核酸检测技术,但是存在检测时间长、通量小和不适合口岸现场检测等缺点,不能满足口岸现场检测要求.结果 总结分析呼吸道病原体的检测技术,微流控技术应用在口岸呼吸道传染病检测具有很强的实用性.结论 微流控技术具有通量大、便携性和准确性好等优点,可以满足口岸呼吸道传染病检测的方法要求.
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HPV感染者外周血淋巴细胞亚群检测与临床意义
目的 研究HPV感染引起宫颈病变宿主外周血淋巴细胞亚群变化情况.方法 采用PCR体外扩增和DNA反向斑点杂交法相结合的DNA芯片技术,分为高危组、低危组和正常对照组;BD流式细胞仪检测外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+细胞、NK细胞含量.结果 高危组外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞比例均低于对照组,而CD8+细胞比例高于对照组(P＜0.01).低危组CD4+、CD4 +/CD8+细胞比例低于对照组,CD8+细胞比例高于对照组(P均＜0.01).CD19+细胞与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 免疫功能低下是HPV感染及反复的主要相关因素.
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基于微流控技术对病原菌基因检测的应用
目的:探讨应用微流控技术对呼吸道病原菌基因检测的效果.方法:通过呼吸道病原菌基因快速检测,标本的DNA提取,经芯片检测.结果:痰标本中,病原菌的检出率70％,其中,46％为单一病原菌感染,54％为两种以上病原菌混合感染.在检出的病原菌中,肺炎链球菌有32例,占46％,其次为肺炎克雷伯菌占19％,鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌占18％,金黄色葡萄球菌占14％,结合分枝杆菌复合群占3％.结论:此方法缩短了病原菌检出的时间,为临床及时给药提供了参考.
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一种具有空腔结构的高分子超细纤维的制备及应用研究
目的:制备一种具有空腔结构的高分子超细纤维并研究其相关性质,探索其应用.方法:结合静电纺丝技术和微流控技术,制备出具有空腔结构的聚乳酸(PLA)超细纤维,并使用荧光显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜等手段进行结构表征;采用甘油铜分光光度法、Alamar-Blue法间接检测了纤维膜的甘油含量和细胞毒性,并考察了其吸水率相较于普通实心纤维膜的变化;将PEI-质粒复合物载入纤维的空腔结构中,通过细胞转染实验验证了此纤维膜在运载质粒方面的应用.结果:纤维平均直径在1μm左右,内部均匀分布着椭圆形空腔.该纤维膜中甘油占比38.99％,吸水率为普通实心PLA纤维膜的近2倍.纤维膜与内皮细胞5天的共培养中,没有明显的细胞毒性.细胞转染检测结果证明了纤维空腔部分能有效运载质粒复合物并保证其生物活性.结论:静电纺丝技术和微流控技术有效结合,成功制备出具有空腔结构的新型高分子超细纤维,展现出了区别于普通纤维的独特性质和应用.
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微流控技术在唾液检测中的应用
当前,检测设备的微型化、集约化已逐渐成为发展的趋势.微流控技术是以在微米尺度对流体进行操作为特点的技术,与传统的检测方法相比具有独特优势.近年来,随着技术的不断成熟,微流控技术在唾液检测中的应用逐渐增多,文章就微流控技术检测唾液在微生物、肿瘤和其他生物标志物方面的应用作一综述.
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微流控技术在精子优选及体外受精中的应用
由于传统辅助生殖技术(ART)成功率低,人们在不断追求探索新的技术.大量研究表明微流控技术具有革新传统体外受精(IVF)操作流程的潜能.与传统方法相比,微流控技术应用于精子优选及体外受精具有效率高、时间短、无离心损伤、实时观察筛选效果、微环境相似及自动化等显著优点,为ART提供了新平台.笔者综述了近年来微流控技术在精子活力评价与筛选、精子化学趋向性筛选、体外受精、精子浓度检测、精子分离富集等方面的应用.同时,本文简要讨论了微流控平台原理、结构设计及操作流程,聚焦各种方法的优缺点以及临床应用的可能性.可见微流控技术应用于ART仍有一些问题亟待解决,有理由相信其未来发展方向是通过制作高度集成化的平台即体外受精-芯片实验室(IVF-lab-on-a-chip)来实现.
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基于微流控技术的分子诊断
微流控技术起源于20世纪50年代初,是以在微米尺度空间对流体进行操作为特征的技术,该技术将原来需要在生物、化学等实验室内完成的实验浓缩到几平方厘米的芯片上,即微流控芯片,又叫芯片实验室[1-2].微流控芯片以微管道网络为特征,以生命科学为主要研究对象,该技术主要涉及高精度的微机电系统、微流体技术、微电子和生物化学等领域.当前全球资源被过度消耗,微型化、集约化已渐成为人类社会发展的趋势.当前临床上基于微流控的分子诊断,主要是指在微流控平台上进行的分子生物标志物的检测,选取代表不同进展阶段的生物标志物进行联合检测,在疾病的诊断、监测和疗效观察方面具有重要价值,有利于疾病的早期发现,与传统的检测方法相比,微流控检测平台具有诸多优势.
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微流控技术在女性人乳头瘤病毒感染筛查中的应用
人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)持续感染是女性宫颈癌发生的主要的病因,并且1996年世界卫生组织(world health orgnization,WHO)将HPV确认为引发宫颈癌的根本性治病因子[1],因此在女性宫颈癌筛查中有必要进行HPV常规检测.HPV亚型种类较多,并且研究表明不同型别的HPV亚型与宫颈癌的相关程度不一致.业界将HPV亚型划分为高危型和低危型两大类几十种亚型,同时对这些HPV亚型进行检测不啻是一项繁琐的工作,我们采用以微流控技术为核心的芯片平台对南京地区女性患者HPV的感染状况进行检测,以期提供一种快速且生物安全性高的HPV分型检测手段.现报告如下.
