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缺铁大鼠肠道黏膜irp2 mRNA及fn mRNA的表达及相互关系
本研究旨在探讨缺铁对大鼠肠道黏膜铁调节蛋白-2(iron regulatory protein 2,IRP2)和铁蛋白(ferritin,FN)表达的影响.建立大鼠缺铁动物模型,实验根据血清铁(sI)、血清铁蛋白(sFn)、Hb结果为分隐性、轻度和中度贫血3个实验组,并设正常对照组.采用氰化高铁法测定血红蛋白,采用火焰法测定sI,用放射免疫分析法测定sFn.以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定不同缺铁状态下irp2mRNA及fn mRNA的表达.结果表明:1随着缺铁程度的加重,sI和sFn量减少,除隐性缺血组sI量外,实验组的sI和sFn量与对照组的差异非常显著(p＜0.01).2随着缺铁程度加重,十二指肠黏膜中irp2mRNA表达增加,在中、轻度缺铁组均高于对照组(p＜0.01);在中度缺铁组高于隐性缺铁组(p＜0.05),有显著性差异,而轻度和中度组间比较无差异(p＞0.05);3随缺铁程度的加重.十二指肠黏膜中fn mRNA的表达逐渐降低,对照组的fn mRNA表达程度高,中度缺铁组fn mRNA表达程度低.各实验组与对照组相比均有差异(p＜0.05),实验组各组之间两两比较各组也有差异(p＜0.05);④中度缺铁组irp2mRNA和fn mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.662,P＜0.05).结论:irp2在转录后水平通过调控fnmRNA的表达影响肠道铁的吸收,是体内铁代谢的重要调节者.
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饮食热能限制对小鼠学习记忆及脑内IRP-2和CREB基因表达的影响
目的 以脑内铁调节蛋白-2(iron regulated protein-2,IRP-2)和cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)基因表达为观测点,探讨饮食热能限制(caloric restriction,CR)对小鼠学习记忆能力的影响.方法 雄性小鼠40只随机均分为正常对照组(normal control group,NC group)、CR组、脑老化组(brain aginggroup,BA group)、CR+BA组,每组10只,Morris水迷宫试验测定学习空间记忆能力,以逆转录聚合酶链反应法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测小鼠大脑IRP-2及CREB基因的表达水平.结果 与NC组相比,BA组逃避潜伏期(escape latency,EL)显著增高(P＜0.05);CR+BA组的EL显著低于BA组(P＜0.05),而与NC组无显著差异(P＞0.05);CR组与NC组的EL相比无明显差异(P＞0.05).BA组IRP-2、CREB表达水平显著低于NC组(P＜0.05);CR组IRP-2、CREB表达水平与NC组相比无明显差异(P＞0.05);CR+BA组IRP-2、CREB表达水平显著高于BA组(P＜0.05),与CR组及NC组相比无明显差异(P＞0.05).结论 CR可以上调BA组小鼠脑内IRP-2及CREB基因表达,提示CR能够通过影响上述两种基因的表达而增强BA组小鼠的学习记忆能力.NC小鼠给予CR后,其脑内IRP-2及CREB基因的表达无明显变化.
关键词： 饮食热能限制 脑老化 铁调节蛋白-2 cAMP反应元件结合蛋白 -
缺铁大鼠肠道黏膜铁调节蛋白-2和转铁蛋白受体mRNA的表达
目的了解缺铁对大鼠肠道黏膜铁调节蛋白-2和转铁蛋白受体(TfR)mRNA表达的影响.方法建立大鼠缺铁动物模型.根据血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、Hb结果分隐性、轻度、中度贫血3个实验组,设正常对照组.取各组缺铁大鼠小块十二指肠黏膜组织,研磨后常规提取RNA备用.按照5′端相同,3′端互补的原则,根据NCBI Gene Bank中IRPs-2和TfR蛋白受体的cDNA序列设计引物,以β-actin为内参对照,做RT-PCR.结果随着缺铁程度加重,十二指肠黏膜中IRP2 mRNA表达增加.中、轻度贫血组均高于对照组(P<0.01),中度贫血组高于隐性贫血组(P<0.05),有显著性差异,而相邻两组间比较无差异(P>0.05);TfR mRNA表达与IRP2 mRNA有相似现象,随着缺铁加重表达增加,实验组均高于对照组(P<0.05),各试验组之间比较均有差异(P<0.05).IRP2 mRNA和TfR mRNA具有显著正相关(r=0.802 P<0.01).结论 IRP2在转录后水平通过调控TfR mRNA表达影响肠道铁的吸收,是体内铁代谢的重要调节者.
