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HSP90表达与人多发性骨髓瘤细胞迁移力的相关性研究
本研究探讨热休克蛋白90(HSP90)与人多发性骨髓瘤细胞迁移力的相关性.采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测经终浓度为50、100、150和200 nmol/L的蛋白酶体抑制剂硼替佐米作用于人多发性骨髓瘤细胞株U266 4小时后细胞中HSP90的mRNA的表达情况.应用Transwell小室迁移实验检测经上述相同浓度硼替佐米作用4小时后U266细胞迁移力的变化.结果表明:随着硼替佐米药物浓度的增加,U266细胞中HSP90α的mRNA表达量逐渐增加(p<0.05),而HSP90β的mRNA表达量虽然总体上有差别(p<0.05),但增加趋势不很明显.随着药物浓度的增加U266细胞迁移力逐渐减弱(p<0.05).结论:HSP90表达与人多发性骨髓瘤细胞迁移力存在相关性.
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siRNA沉默长链非编码RNACCAT2对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226、U266细胞的体外杀伤作用
目的 探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默长链非编码RNA肠癌相关转录子2(CCAT2)表达对人多发性骨髓瘤细胞株RPM I 8226、U266的体外杀伤作用.方法 选取对数生长期RPM I 8226、U266细胞经脂质体法转染2条靶向沉默CCAT2的siRNA(siCCAT2-1、siCCAT2-2),实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测基因水平上沉默CCAT2好的siRNA用于后续实验(实验组),同时设立阴性对照组(转染无意义序列)和空白对照组(未转染).采用细胞计数试剂盒-8检测各组细胞增殖的抑制率,流式细胞术Annexin Ⅴ-FITC/PI双染法检测各组的凋亡率,qPCR法检测各组凋亡相关基因的mRNA水平,Transwell法检测各组侵袭转移细胞数目.结果 siCCAT2-1、siCCAT2-2转染后多发性骨髓瘤细胞株中的CCAT2水平均降低,与空白对照组和阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均 P<0.05);且RPMI 8226、U266细胞中siCCAT2-2转染抑制率高于siCCAT2-1(均 P<0.05),故选取siCCAT2-2来验证细胞学功能.实验组RP-M I 8226、U266细胞的增殖抑制率均高于空白对照组和阴性对照组(均 P<0.05),且总体上抑制效果呈时间依赖的趋势;与其余两组相比,实验组RPMI 8226细胞的凋亡率及Bax、Bad的mRNA水平升高,Bcl-2水平及 Transwell穿膜细胞数降低,差异有统计学意义(均 P<0.05).空白对照组和阴性对照组以上指标的差异无统计学意义(均 P>0.05).结论 在多发性骨髓瘤细胞株中,siRNA靶向沉默CCAT2表达可抑制其增殖、侵袭转移并诱导凋亡,可能在多发性骨髓瘤防治中有一定价值.
关键词： 小干扰RNA 长链非编码RNA肠癌相关转录子2 多发性骨髓瘤细胞株 增殖 凋亡
