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IL-1β促进脐带间充质干细胞的造血支持作用
本研究旨在探讨IL-1β对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)的造血支持的影响.将分离得到的hUC-MSC以2×106接种于75 cm2培养瓶中,贴壁2h后,加入10 ng/ml IL-1β培养36 h后收集培养上清和细胞.观察有/无IL-1β的条件培养液对CD34+细胞造血支持的影响;real time PCR检测加/不加IL-1β MSC的造血相关因子mRAN的变化;ELISA法检测造血相关因子的差异.结果表明,含有IL-β的MSC条件培养液能明显增强CD34+细胞集落形成能力,且以粒系和粒-单核集落形成单位为主.IL-1β促进了MSC GM-CSF、G-CSF、IL-6的mRNA的表达,促进GM-CSF、G-CSF、IL-6蛋白自脐带MSC的分泌.结论:IL-1β能够增强MSC的造血支持能力,尤其是向髓系分化的能力.
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人脐血贴壁层细胞对脐血造血细胞体外扩增的作用
实验于2004-10/2005-06在吉林省肿瘤防治研究所和吉林医药学院病原教研室完成.脐血采自长春市妇产医院健康产妇,知情同意,足月顺产,待胎儿娩出后,无菌经脐静脉穿刺取血,枸橼酸钠抗凝.Ficoll-paque淋巴细胞分层液(相对体积质量:1.077±0.22)密度梯度离心法分离出脐带血单个核细胞后,采用长期液体培养法培养脐带血贴壁层细胞,并与脐带血单个核细胞共同培养,观察细胞生长形态并通过流式细胞仪分析细胞周期.结果显示,脐带血贴壁层细胞与脐带血单个核细胞共培养7 d后,与无贴壁层细胞培养的脐带血单个核细胞的细胞周期相比,贴壁层细胞能明显促进细胞的增殖,S+G2+M期细胞百分数明显增高,差异具有显著性意义[(42.7±1.1)%,(35.5±2.8)%,P＜0.05].脐血贴壁层细胞能促进脐血单个核细胞进入细胞周期,体外扩增后的脐血单个核细胞集落形成能力明显大于无贴壁细胞[(57.7±4.7)个/5×104,(40.3±5.1)个/5×104,P＜0.01].
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噬菌体抗体库淘筛方法的比较研究
目的:比较噬菌体抗体库的淘筛方法,从而为得到亲和力高、特异性强的抗体克隆打下基础.方法:在包被好抗原的2个细胞培养瓶中加入噬菌体抗体库,一个采用先直接加入宿主菌感染后,再将培养瓶内残留结合物洗脱中和后感染的方法,另一个则采用先洗脱并中和的噬菌体感染宿主菌,与抗原结合的剩余的噬菌体再行直接感染,将2种方法所得到的感染菌和援救所得的噬菌体进行CFU和PFU测定.结果:从实验的数据中可以发现,采用第一种方法所得次级库的容量要大于后一种方法所得的初级库.结论:噬菌体抗体库的淘筛方法必须按照实验的具体情况进行选择,如果要求严谨度适中,则可以采用直接感染的方法淘筛.
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结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性
目的：建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra 菌悬液，菌悬液2倍梯度稀释后，分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm 处的光密度值（OD600值），并分析 OD600值与稀释倍数曲线，确定佳的菌悬液制备方法，OD600线性范围，以及 OD600值与CFU 关联曲线。结果 OD600值为0．1～0．6，线性范围内 OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示，玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数（R2）分别为0．98、1．00，均呈良好的相关性，且低频超声法比玻璃珠研磨法的相关性好，其菌液分散更均匀。OD600值与 CFU 值线性回归分析结果显示，玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是：CFU＝2．35×107×OD600＋4．42×105、CFU＝3．26×107×OD600＋6．89×105。结论低频超声法是一种较好的结核分枝杆菌菌悬液制备方法，结合 OD600值测定，可成为一种可靠、快速的结核分枝杆菌定量方法。
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中药抗真菌方干预小鼠外阴阴道念珠菌病的研究
目的:探讨中药抗真菌方灌胃是否干预小鼠外阴阴道念珠菌感染.方法:将65只BALB/c雌鼠(8周龄)随机分为A组(30只,模型中药组)?B组(30只,模型对照组)和C组(5只,空白对照组).自第1天开始,A组小鼠予中药抗真菌方煎液灌胃,B组和C组予生理盐水灌胃,持续至实验结束.A?B两组在第4天接种白念珠菌,于第8?9?10?12?14?21天每组分别各选取5只小鼠取阴道灌洗液进行菌落培养,并通过ELISA检测IL-12?IL-10?IL-6水平.C组在第8天同时进行阴道灌洗液的采集.结果:从感染后第2天起,A组培养菌落数开始明显小于B组(P值均<0.05).A?B两组阴道灌洗液中IL-6与IL-12均出现增加,IL-10明显降低.A组和B组小鼠阴道灌洗液中IL-6水平较空白组增加,但A组与B组间无明显差异.两组间IL-12在感染后第1?5?7?14天有明显差异,IL-10则在感染后第2d时出现明显差异.结论:中药抗真菌方可减轻小鼠外阴阴道念珠菌感染.
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洁净手术室自净前后微生物浓度对比实验
针对洁净手术室在运行使用中,有的没有采用自净就接台的情况而进行微生物浓度自净前后对比测试,进一步阐述接台前必须进行自净的必要性,要有效避免和防止而交叉感染,强调参加实施手术的全体人员必须遵守必要的规定.
