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黄芩提取化合物单体SBX抗白血病效应及机制研究
本研究探讨黄芩提取化合物单体成分SBX对不同人白血病细胞株的抗白血病效应及其可能的相关机制.体外培养人HL-60、NB4、U937、K562、Jurkat细胞,应用CellTiter-Glo(@)发光法进行细胞活力检测,筛选出敏感细胞株,应用流式细胞术检测SBX对敏感细胞细胞周期的影响,应用蛋白Pathway Array技术检测SBX对敏感细胞蛋白表达的影响.结果显示,SBX( 10 - 200 μmol/L,72 h)对各种类型的人白血病细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性(r值分别为0.86,0.88,0.95,0.94,0.96),对HL-60细胞抑制作用强.流式细胞术显示SBX(50,100μmol/L,48 h)对HL-60细胞周期的影响主要是引起G0/G1期阻滞.蛋白Pathway Array技术分析SBX(50 μmol/L,48 h)对HL-60蛋白表达的影响显示,p-PKCα/βⅡ、p-p38、Cdc25B、XIAP蛋白表达水平上调,而p-AKT、p-SAPK/JNK、cyclin E、Notch4、Cdk4、Cdc2、Akt、Bcl-2、Bax、cdc42、TNF-α、p27、CaMKKa蛋白表达水平下调.结论:SBX能够抑制各种类型人白血病细胞的增殖,其中敏感细胞株为HL-60.SBX主要影响HL-60的EGFR、Ras/Raf/MAPK和Notch信号传导通路,并通过这些信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达的水平,导致细胞周期G0/G1期阻滞.
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黄芩提取化合物SBX对NSCLC细胞系细胞增殖及信号传导通路影响研究
目的:观察黄芩提取化合物单体成分SBX对人NSCLC细胞系H1975和H1944细胞株增殖的影响,初步探讨SBX对NSCLC细胞系抑制的机制.方法:体外培养人H1975和H1944细胞株,以0、10、25、50、100和200 μmol/L的SBX处理细胞,应用MTT法检测SBX对细胞增殖的影响,筛选出敏感细胞株.应用流式细胞术检测SBX对敏感细胞株细胞周期的影响,应用Protein Pathway Array技术检测SBX对敏感细胞株蛋白表达的影响.结果:SBX对两种类型的NSCLC细胞株均有抑制作用,并呈剂量依赖性,对H1975和H1944细胞株的IC50值分别为(38.3±1.25)和(62.5±1.76) μmol/L.SBX对H1975和H1944细胞抑制作用比较,对H1975细胞抑制作用更强,P＜0.001.流式细胞术显示,SBX对H1975细胞周期的影响主要是引起G0/G1期阻滞和凋亡增加,与空白对照组相比,P＜0.001.50和100 μg/mL的SBX分别作用于H1975细胞后,阻滞在G0/G1期的细胞由35.47％分别升至54.36％和73.37％,S期的细胞由61.60％分别降至41.63％和19.14％.应用Protein Pathway Array技术分析SBX对H1975蛋白表达的影响显示,共检测166个磷酸化和非磷酸化蛋白,其中53个蛋白表达,有差异性表达的蛋白共15个.其中Cdk6、EGFR、Survivin和mTor蛋白表达水平上调,而p27、p-RB、Cyclin D1、Cyclin E、XIAP、p53、p-p53、p-AKT、Akt、Notch4和Cdk4蛋白表达水平下调.结论:SBX能够抑制人NSCLC细胞系H1975和H1944细胞株的增殖,敏感细胞株为H1975;SBX主要影响H1975的EGFR和Notch信号传导通路,并通过以上信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达水平的变化,导致细胞周期G0/G1期阻滞,凋亡增加.
