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Rv3407蛋白文献资料
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结核分枝杆菌Rv3407蛋白抗原表位的预测
目的 预测结核分枝杆菌Rv3407的抗原表位. 方法 利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3407氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位. 结果 Rv3407蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于11-26、28-43、50-61、66-74、76-99位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高.该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于2-12、22-26、34-37、40-44、56-60、75-79、86-93位氨基酸残基或其附近. 结论 结核分枝杆菌Rv3407是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少,预测结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与应用奠定了基础.
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结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407的构建及体外表达
目的 构建结核DNA疫苗质粒pVAX1-Rv3407,并检测其在哺乳动物细胞293T中的表达.方法 以基因重组卡介苗(rBCG)AERAS-422基因组为模板,PCR扩增Rv3407基因,构建真核表达质粒pVAX1-Rv3407,转染293T细胞,采用免疫荧光法及Western blot法检测Rv3407蛋白的表达.结果 PCR扩增获得长300 bp的Rv3407基因片段；重组真核表达质粒pVAX1-Rv3407经双酶切及DNA测序证明构建正确；转染48 h后,Rv3407蛋白在293T细胞中有效表达,且主要分布在细胞质中.结论 成功构建了结核DNA疫苗质粒pVAX 1-Rv3407,为新型结核病疫苗的研制奠定了基础.
