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p40、TTF-1、Napsin-A在肺非小细胞癌中的表达
随着粗针穿刺技术以及新辅助化疗技术的进步和发展,越来越多的肺肿瘤在手术前就进行了活检或穿刺,但有一小部分活检或穿刺的标本因肿瘤分化差无法在HE切片中作出明确诊断.为了解决这个问题我们对101例肺非小细胞癌进行了p40、p63、CK5/6、TTF-1、CK7和天门冬氨酸蛋白酶(Napsin-A)的研究,以探讨这几种免疫组化标记在肺非小细胞癌中表达的敏感性和特异性.
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p40、天门冬氨酸蛋白酶、甲状腺转录因子-1在肺鳞癌与腺癌表达敏感性和特异性
目的：探讨肺非小细胞癌组织中鉴别鳞癌和腺癌有意义的免疫组化检测标记。方法：采用免疫组织化学SP法检测非小细胞肺癌51例组织中p63、p40、CK5/6、甲状腺转录因子-1（TTF-1）、CK7、天门冬氨酸蛋白酶（Napsin-A）的表达。结果：（1）p40、p63、CK5/6在非小细胞肺癌中表达：非小细胞肺癌51例中，p40、p63、CK5/6在鳞状细胞癌20例中阳性表达为20例（100.0%），19例（95.0%)，18例（90.0%），在腺癌31例组织中阳性表达为0例（0.0%）、6例（19.4%）、3例（9.7%)。p40在31例腺癌中无1例表达，特异性高于p63、CK5/6(χ2=6.424，P＜0.05)，而p63、CK5/6两组间特异性比较差异无统计学意义。（2）TTF-1、CK7、Napsin-A在非小细胞肺癌中表达：非小细胞肺癌51例中，TTF-1、CK7、Napsin-A在肺腺癌31例中阳性为27例（87.1%）、25例（80.6%）、28例（90.3%），在鳞状细胞癌20例组织中阳性表达分别为1例（5.0%）、7例（35.0%）、0例（0.0%），TTF-1和Napsin-A阳性表达特异性高于CK7(χ2=12.197，P＜0.01)。结论：p40、NapsinA、TTF-1联合检测可更好地鉴别诊断肺非小细胞癌，为临床进行靶向治疗提供依据。
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组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基对酶活性的作用
目的 探讨组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基在酶活性中的作用.方法 通过基因点突变,将大鼠组织蛋白酶E内羧基端的活性部位基序中第284位苏氨酸残基用丝氨酸进行替代,构建变异体T284S.结果 当将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在HEK 293T细胞中进行异源表达时,在细胞培养基和细胞提取物中都发现有野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E的酶原蛋白表达.突变体T284S仍具有自我转化为成熟型酶的能力,尽管它们的酶活性只是野生型的40%,变异体的Km值与野生型的相似,但它的Kcat值却比野生型显著下降.变异体和野生型酶都被胃酶抑素和蛔虫胃蛋白酶抑制剂所抑制,Ki值几乎相同.变异体在各种酸碱度下的圆二色光谱与野生型基本相同.结论 (1)第284位苏氨酸残基对酶的催化活性确实非常重要.变异体T284S酶催化活性的下降是由于多出来的甲基使活性部位氢键的分布发生改变,从而使酶与底物的作用模式发生改变.(2)BACE-1不能被胃酶抑素抑制,可能与羧基端结构域的活性部位基序差异无关,而与BACE1蛋白结构中的其它部分有关.
