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组织蛋白酶E文献资料
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组织蛋白酶E与肺部疾病的研究进展
组织蛋白酶E是一种细胞内天冬氨酸蛋白酶,与组织蛋白酶D具有高度同源性,主要存在于免疫系统的抗原提呈细胞内,在细胞凋亡、肿瘤生长抑制、免疫反应中都起着重要作用.另外,组织蛋白酶E在肺实质重塑及气道变应性炎症中的作用也很重要.目前国内关于组织蛋白酶E的研究还较少,而国外的研究则关注于组织蛋白酶E在免疫系统的作用.本文就近年来组织蛋白酶E在肺部疾病的发生、发展中的作用简要综述.
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组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基对酶活性的作用
目的 探讨组织蛋白酶E第284位苏氨酸残基在酶活性中的作用.方法 通过基因点突变,将大鼠组织蛋白酶E内羧基端的活性部位基序中第284位苏氨酸残基用丝氨酸进行替代,构建变异体T284S.结果 当将野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E基因在HEK 293T细胞中进行异源表达时,在细胞培养基和细胞提取物中都发现有野生型和变异型的大鼠组织蛋白酶E的酶原蛋白表达.突变体T284S仍具有自我转化为成熟型酶的能力,尽管它们的酶活性只是野生型的40%,变异体的Km值与野生型的相似,但它的Kcat值却比野生型显著下降.变异体和野生型酶都被胃酶抑素和蛔虫胃蛋白酶抑制剂所抑制,Ki值几乎相同.变异体在各种酸碱度下的圆二色光谱与野生型基本相同.结论 (1)第284位苏氨酸残基对酶的催化活性确实非常重要.变异体T284S酶催化活性的下降是由于多出来的甲基使活性部位氢键的分布发生改变,从而使酶与底物的作用模式发生改变.(2)BACE-1不能被胃酶抑素抑制,可能与羧基端结构域的活性部位基序差异无关,而与BACE1蛋白结构中的其它部分有关.
