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小干扰RNA靶向沉默CXCR2基因抑制肝癌细胞的增殖
目的 研究CXCR2-小干扰RNA(siRNA)基因体外抑制肝癌细胞增殖的作用.方法 将CXCR2-siRNA以脂质体转染法转染肝癌细胞hepG2,24h后荧光显微镜观察细胞荧光含量.采用RT-PCR及免疫印迹法分别检测正常肝Chang细胞、未转染肝癌hepG2细胞以及转染CXCR2-siRNA基因后hepG2细胞在转染24、48、72h后的CXCR2 mRNA和蛋白表达水平.以未转染的hepG2细胞为对照,CCK8法检测转染CXCR2-siRNA的hepG-2细胞在转染24、48、72 h后的增殖.以未转染的hepG2细胞为对照,检测转染CXCR2-siRNA 24 h后hepG2细胞与Transwell小室孵育24h时的侵袭能力.结果 CXCR2-siRNA转染hepG2 24 h后镜下可见大量绿色荧光,转染率为80％.hepG2细胞CXCR2mRNA和蛋白表达水平高于Chang细胞(mRNA:1.69±0.22比0.63±0.31,蛋白:1.93±0.25比0.84±0.29,均P＜0.05).转染CXCR2-siRNA24和48 h后hepG2细胞CXCR2mRNA表达量低于未转染的hepG2细胞(0.75±0.24、0.83±0.21比1.78±0.25,均P＜0.05),72 h后CXCR2-siRNA虽然仍能抑制hepG2细胞CXCR2mRNA的表达,但与未转染的hepG2细胞相比差异并无统计学意义(1.35±0.18比1.78±0.25,P＞0.05).转染CXCR2-siRNA24和48 h后的hepG2细胞CXCR2蛋白表达低于未转染的hepG2细胞(0.91±0.25、1.16±0.23比1.98±0.31,均P＜0.05),转染72 h后蛋白水平有所上升,与对照组相比差异无统计学意义(1.71±0.18比1.98±0.31,P＞0.05).转染CXCR2-siRNA 24、48、72 h后hepG2细胞mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义.与未转染的hepG2细胞相比,转染CXCR2-siRNA 24、48、72 h后hepG2细胞增殖受到抑制(均P＜0.05).转染CXCR2-siRNA的hepG2细胞对Transwell小室的侵袭能力明显低于未转染的hepG2细胞[(36±5)个腐倍视野(×200)比(526±9)个府倍视野(×200),P＜0.05].结论 siRNA沉默CXCR2基因体外可有效抑制肝癌细胞的增殖.
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选择性非肽类CXCR2抑制剂SB225002对大鼠脉络膜新生血管的抑制作用
目的 观察CXC趋化因子受体2(CXCR2)的选择性非肽类抑制剂SB225002对大鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用.方法 实验研究.使用激光对12只棕色挪威大鼠诱导脉络膜新生血管(CNV),6只光凝术后立即玻璃体腔注射10μmol/L的SB225002,6只给予二甲基亚砜作为对照.3只大鼠未给予激光光凝及眼内注射,作为阴性对照用于定量实时逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)检查.光凝术后7 d,采用荧光素眼底血管造影分析CNV损伤荧光素渗漏的变化,脉络膜铺片定量分析CNV面积的变化,qRT-PeR观察视网膜色素上皮一脉络膜复合物CXCR2和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平的变化.荧光素眼底血管造影图像的渗漏评分比较采用Mann-Whitney检验;CNV面积比较采用配对t检验;CXCR2或VEGF的mRNA水平比较采用Wilcoxon检验.结果 10μmol/L的SB225002能有效抑制CNV损伤造成的荧光素渗漏.光凝术后7 d 10μmol/L的SB225002组脉络膜铺片的CNV面积为(10531 4±4627)μm2,DMSO组为(30974±6762)μm2,10μmol/L的SB225002组面积较DMSO组缩小66%(t=2.54,P=0.001).10μmoL/L SB225002组CXCR2 mRNA和VEGF mRNA相对值分别为1.22 4±0.92和1.93±0.87,与DMSO组的差异具有统计学意义(t=8.54,3.61;P=0.007,0.002).结论 SB225002在CNV形成早期通过阻断IL-8与CXCR2的结合,能够有效抑制血管的新生,提示治疗CNV的一个新的化疗干预机制.
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CXCL5/CXCR2生物轴在胰腺癌中的研究进展
胰腺癌的增殖、进展、转移是一个多因素参与的过程.其中,CXC类趋化因子配体5(CXCL5)能够识别并结合CXC类趋化因子受体2(CXCR2),通过细胞自分泌或旁分泌等途径激活或调节信号通路的表达.CXCL5/CXCR2生物轴能够在胰腺癌细胞的增殖、黏附、侵袭、转移和预后中发挥作用,并且与胰腺癌血管及淋巴管生成等相关.直接或间接调控CXCL5/CXCR2在胰腺癌中的表达,有望成为靶向治疗胰腺癌的有效手段.
