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垂体催乳素瘤的病因及发病机制的实验研究
应用在同一只雄性SD大鼠中,保留原位垂体并在肾囊内植入一异体垂体,同时背部埋植装有17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)的药泵,经E2在体作用60～120天后,其原位垂体和异体移植入肾囊的垂体同时形成垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,研究PRL瘤的发病机制.结果表明,E2长期作用可诱发原位垂体和远离下丘脑的移植垂体同时形成PRL瘤,并伴高PRL血症和PRL基因的高表达;体外和体内实验结果均显示,一些相关生长因子或细胞因子可能与PRL瘤的形成有关;分析正常垂体、原位和移植垂体瘤中PRL基因调控序列的结构,表明在原位垂体瘤中PRL基因近端启动子区发生点突变,突变启动子活性增高,而移植垂体瘤PRL基因相应序列无改变.上述结果提示:垂体PRL瘤可能原发于腺垂体水平,但未排除继发于下丘脑异常的另一可能性;雌激素诱发原位和移植垂体形成PRL瘤的发病机制可能不尽相同;体内神经-内分泌-免疫网络在原位垂体PRL瘤的发生过程可能起一定作用,但其确切证据尚待深入探讨.
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腺垂体细胞培养及低温冻存研究
垂体移植目前依就是解决垂体功能低下的有效治疗手段.垂体细胞的培养及低温冻存是垂体移植研究中的基础.本文对腺垂体培养的发展过程及目前的现状进行了简要的回顾和概括,对低温冻存的理论发展过程做过综述,同时从腺垂体移植发展的角度对垂体细胞培养及垂体移植工作的意义前景做了展望.
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垂体腺瘤细胞培养的实验研究
目的通过对垂体腺瘤细胞体外培养以垂体腺瘤细胞为移植物供体进行颅外移植,补充垂体功能不足及为腺垂体移植细胞库的建立奠定基础. 方法利用术中切除的垂体腺瘤组织进行了体外培养,并通过染色和放射免疫测定技术,评价体外培养的垂体腺瘤组织的功能状态,寻找其功能佳间期的规律. 结果没有NGF和HRP介入的情况下,垂体腺瘤细胞的形态和功能状态在培养的第6天为佳. 结论体外培养的垂体腺瘤细胞仍具有分泌激素的功能,为以垂体腺瘤细胞为移植物供体进行颅外移植的研究奠定了实验基础.
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异体垂体移植大鼠E2诱致催乳素瘤的实验研究
目的探讨催乳素瘤的发病机理,验证其原发于腺垂体的假说.方法应用雄性S.D.大鼠进行异体垂体移植,并通过背部埋植17-β雌二醇(E2)药泵,观察E2对大鼠原位垂体,异体移植于肾囊的垂体及血浆催乳素(prolactin,PRL)水平的影响.并利用上述垂体细胞原代培养及原位杂交组化方法,研究经E2作用120 d后的原位及移植垂体细胞中PRL基因表达水平的改变.结果经E2作用60 d及120 d后,大鼠体重分别降至正常大鼠的74%(P＜0.01)和50%(P＜0.001),原位垂体及移植垂体的重量则较对照组增加达三倍以上(P＜0.001),并伴高催乳素血症,血浆催乳素水平为对照组的100～200倍(P＜0.001).原位杂交结果表明,E2作用120 d后,原位及移植垂体细胞中PRL mRNA水平分别升高为正常大鼠垂体细胞的3.1倍和3.5倍(P＜0.001),且二者的表达水平无显著差异.结论提示E2也可不经下丘脑机制直接作用于腺垂体水平诱发催乳素瘤,即催乳素瘤有可能原发于腺垂体.但本工作尚未进一步排除催乳素瘤的形成涉及下丘脑机制的可能性.
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兔下丘脑-垂体移植的内分泌功能研究
目的:探讨幼兔的下丘脑-垂体异体异位移植后内分泌重建的可能性.方法:以徒手定向穿刺成兔垂体区,射频毁损垂体建立去垂体动物模型,将制备好的幼兔的下丘脑-垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内,放免测定术后1、3及8w血清T4、PRL、GH水平.结果:垂体去除组上述激素水平持续下降.移植组术后8w上述激素恢复到术前水平.结论:下丘脑-垂体细胞的异体异位移植,内分泌过继可靠.
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兔异体异位下丘脑-垂体移植的实验
目的探讨幼兔的下丘脑-垂体异体异位移植后,细胞成活及内分泌重建的可能性.方法以徒手定向穿刺成兔垂体区,射频毁损垂体建立去垂体动物模型,将制备好的幼兔下丘脑-垂体组织植入模型兔的臀部肌肉内,放免测定术后1,3及8 wk血清T4,PRL,GH水平.结果垂体去除组上述激素水平持续下降.移植组术后8 wk上述激素恢复到术前水平.术后3 wk移植物HE染色见垂体及下丘脑细胞结构良好.术后8 wk透射电镜下见垂体细胞结构正常,胞质内有大量的分泌颗粒,下丘脑神经细胞明显增生,部分细胞变形、空化,突轴终末有较多的神经分泌颗粒.结论下丘脑-垂体细胞的异体异位移植,其细胞组织学分化良好,内分泌过继可靠.
