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乙二胺四乙酸联合正丁醇在大鼠胫骨癌痛标本石蜡切片制作中的应用
目的 探索一种简便有效的制作大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片的方法. 方法 取大鼠胫骨癌痛模型组和正常组胫骨标本,使用乙二胺四乙酸(EDTA)加温脱钙联合正丁醇取代传统强酸脱钙、纯酒精脱水和二甲苯透明,制作石蜡切片后HE染色观察. 结果 两组大鼠胫骨癌痛标本形态结构均保存完整.与传统方法相比,制片步骤简单,脱水和透明时间较为灵活,蜡块切割性能较好.结论 EDTA与正丁醇的联合应用,是大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片制作适宜和可靠的方法.
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脊髓后角胶质细胞活化在大鼠骨癌痛发生中的作用
目的:观察N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体2B亚型(NR2B)选择性拮抗剂Ro25-6981对胫骨癌痛大鼠脊髓后角星型胶质细胞的影响,探讨骨癌痛的发生机制.方法:采用Walker256乳腺癌细胞建立雌性SD大鼠胫骨癌痛模型.将大鼠随机分为3组(每组8只):假手术组(Sham组)、模型组(M组)和Ro25-6981组(R组).假手术组只行鞘内置管,模型组鞘内注射(IT)生理盐水20μ1,Ro25 6981组于建立大鼠骨癌痛模型前30 min及术后第7天IT Ro25-6981 20 μl(0.5 mg/ml).Sham组于假手术后3d及R组和M组均于术后14 d分别取8只大鼠,测定机械痛阈阈值后断头处死,取患侧L4-6脊髓背角组织,采用免疫组化方法观察GFAP、OX-42及NR2B的表达变化判断Ro25-6981对脊髓背角星形胶质细胞及小胶质细胞活化的影响.结果:各组术前基础机械痛阈比较差异无统计学意义(P＞0.05).与Sham组比较,M组术后14 d时机械痛阈降低(P＜0.01),Ro25-6981组术后14 d时机械痛阈降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,Ro25-6981组术后14 d时机械痛阈升高(P＜0.05).与Sham组相比,Ro25-6981组和M组术后14 d时脊髓背角GFAP、OX-42和NR2B蛋白表达均升高(P＜0.05);与M组比较,R组术后14 d时脊髓背角GFAP、OX42和NR2B蛋白表达降低(P＜0.05).结论:鞘内注射Ro25-6981可抑制脊髓背角星形胶质细胞和/或小胶质细胞激活,有效地预防大鼠胫骨癌痛的发生及发展.
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华蟾素对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的作用及其机制的研究
目的 探讨华蟾素对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的作用及其机制.方法 选取SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、华蟾素组和阳性对照组,每组10只,模型组、华蟾素组和阳性对照组建立骨癌痛模型,7d后,分别腹腔注射生理盐水、华蟾素及吗啡,检测各组大鼠后肢机械痛阈值和热痛阈值;采用ELISA法检测各组血浆β-内啡肽(β-END);采用免疫组化检测各组肿瘤组织β-END蛋白、μ受体(μ-OR)蛋白和δ受体(δ-OR)蛋白.结果 与模型组比较,给药后第3、6、9天华蟾素组的机械痛阈值明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与假手术组比较,给药后第3、6、9天的华蟾素组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,给药后第3、6天华蟾素组的热痛阈值明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,华蟾素组血浆β-END明显增高;与假手术组和阳性对照组比较,华蟾素组血浆β-END明显降低(P＜0.05).与模型组和阳性对照组比较,华蟾素组肿瘤组织β-END蛋白明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与假手术组比较,华蟾素组肿瘤组织β-END蛋白明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,华蟾素组肿瘤组织μ-OR蛋白及δ-OR蛋白表达明显增高(P＜0.05);与假手术组比较,华蟾素组肿瘤组织μ-OR蛋白及δ-OR蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 华蟾素可减轻胫骨癌痛大鼠的机械痛敏,可能与其提高肿瘤组织阿片受体表达有关.
