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2.136微丝对豚鼠胃窦平滑肌细胞钾电流的影响
目的观察微丝对豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的影响,并且探讨肌动蛋白微丝是否参与低渗牵张增强豚鼠胃窦环行平滑肌细胞钾电流的过程.
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2.130不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响
目的不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流的影响.方法本实验在急性分离的豚鼠胃窦平滑肌上,利用膜片钳技术的全细胞记录法观察了外源性不饱和脂肪酸对豚鼠胃窦平滑肌细胞钙激活钾电流(IK(Ca))的影响,及其作用机制.
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旋覆代赭汤对胃窦平滑肌细胞收缩和钙离子浓度的影响
目的:观察不同浓度旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)Ca2+浓度的影响,并探讨其对胃SMC收缩力作用机制.方法:分离大鼠胃窦SMC,加入不同浓度(5%、10%、20%)含药血清和胃动素,观察含药血清对胃窦SMC收缩作用,CPC法检测细胞Ca2+总浓度变化.结果:5%、10%、20%旋覆代赭汤含药血清刺激胃窦SMC,随剂量的增加细胞收缩活动逐渐增强(P<0.05).细胞收缩后,各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内钙离子总浓度相比较无明显差异.结论:旋覆代赭汤可使胃窦SMC明显收缩,其机制可能是与IP3R使细胞内质网释放Ca2+引起胃窦SMC Ca2+升高有关.
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胃动素对胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度的影响及机制
目的:观察胃动素对新生大鼠胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度的影响及机制.方法:采用激光共聚焦显微镜结合细胞内荧光染色观察不同条件下相同浓度胃动素对培养大鼠胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度的影响.结果:细胞膜Ca2+通道阻断剂维拉帕米、含Ca2+螯合剂EGTA的D-Hank's液及细胞内Ca2+释放阻断剂TMB-8均可不同程度抑制MTL对胃窦平滑肌细胞内Ca2+的升高作用.结论:MTL具有升高胃窦平滑肌细胞内Ca2+的作用,细胞外Ca2+内流和内Ca2+释放参与了这种作用.
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微丝对豚鼠胃窦平滑肌细胞延迟整流性钾电流的影响
目的:探讨微丝对豚鼠胃窦平滑肌细胞延迟整流性钾电流和低渗牵张增强延迟整流性钾电流过程中的影响.方法:采用传统全细胞膜片钳技术记录急性分离的胃窦平滑肌细胞延迟整流性钾电流.结果:20μmol/L细胞松弛素B(微丝的解聚剂)增强延迟整流性钾电流(Ik(v));而20μmol/L鬼笔环肽(微丝的稳定剂)抑制Ik(v).低渗灌流可增强Ik(v);电极内液中分别给予20μmol/L细胞松弛素B和鬼笔环肽时,低渗灌流也增强Ik(v),但是与对照组相比无显著性差异.结论:在豚鼠胃窦平滑肌细胞,微丝调节延迟整流性钾通道的活动,但是可能不参与低渗牵张增强延迟整流性钾电流的过程.
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旋覆代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞收缩及信号传导通路的影响
[目的]观察不同浓度的旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)收缩及钙离子(Ca2+)浓度的影响,探讨其对胃SMC收缩及信号传导的作用机制.[方法]分离大鼠单个胃窦SMC细胞,分别加入不同浓度含药血清(5%、10%、20%)和三磷酸肌醇(IP3)受体阻滞剂(肝素),镜下观察含药血清对胃窦SMC收缩作用,检测细胞Ca2+总浓度.[结果]旋覆代赭汤含药血清刺激胃窦SMC,随剂量的增加细胞收缩活动逐渐增强(P<0.05),肝素可抑制旋覆代赭汤含药血清对胃窦SMC的收缩作用(P<0.05),各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内Ca2+总浓度相比差异无统计学意义.[结论]旋覆代赭汤含药血清可使胃窦SMC收缩,其机制可能是通过IP3信号途径来介导细胞内质网释放Ca2+,使细胞内Ca2+升高,引起胃窦SMC收缩.
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大鼠胃窦平滑肌细胞原代培养优化与鉴定研究
目的:为提高大鼠胃窦平滑肌细胞(GASMC)原代培养成活率,对原代培养大鼠胃窦平滑肌细胞方法进行创新与优化,以增强胃窦平滑肌细胞原代培养方法实用性、可操作性.方法:绝对严格无菌环境取大鼠胃窦组织,剥离胃粘膜层及浆膜层,应用优化法原代培养、0.25%胰酶消化传代培养、苏木素染色法细胞形态观察、免疫组化法细胞鉴定.结果:应用优化大鼠胃窦平滑肌细胞原代培养法2~4天组织块周围有长梭形细胞爬出,5~8天爬出细胞放射状或网状生长,9~11天有明显“峰-谷”样结构,且相互融合.传代细胞生长速度快,呈大片融合,细胞体积增大.免疫组化染色鉴定表达阳性的细胞93%以上.结论:应用优化的大鼠胃窦平滑肌细胞原代培养方法,细胞生长快、成活度高、操作简便易行,具有创新性,实用性强,值得推广.
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旋覆代赭汤含血清对胃窦平滑肌细胞IP3受体及钙离子浓度影响的实验研究验
目的:观察旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)IP3,受体(IP3R)及钙离子(ca2+)浓度的影响.方法:分离大鼠胃窦SMC,加入IP3受体拮抗剂肝素后,镜下观察含药血清对胃窦SMC收缩作用;检测细胞Ca2+总浓度.结果:IP3受体拮抗剂肝素可抑制旋覆代赭汤含药血清对胃窦SMC的收缩作用;各剂量组与无钙缓冲液组的细胞内钙离子总浓度相比较无明显差异.结论:旋覆代赭汤含药血清可使胃窦SMC收缩,其机制可能是通过IP3,通路作用于细胞,引起细胞内质网释放Ca2+使胃窦SMC Ca2+升高.