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Lunasin减轻大鼠运动性关节软骨损伤
目的 探讨多肽Lunasin对运动性关节软骨损伤的治疗作用及机制.方法 将大鼠随机分为对照组和模型组,在注射给予木瓜蛋白酶造模后,标准饲养28 d,然后将模型大鼠分为单纯模型组、0.01、0.05和0.1 mmol/L Lunasin治疗组(每组10只,治疗时间1个月).治疗结束后分别用ELISA和RT-PCR检测血清及组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-6及MMP-8 mRNA的表达;用试剂盒检测SOD活性及iNOS,用Western blot检测NRF2、Keap1、LC-3Ⅱ、Bax、Beclin1、p-AMPK和AMPK蛋白的表达.结果 模型组中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-6以及MMP-8在血清及组织中含量较对照组均显著升高(P<0.05),Lunasin治疗后上述因子均显著回降(P<0.05);并且Lunasin治疗能显著提高SOD的活性(P<0.05),上调NRF2的表达并降低iNOS的产生(P<0.05);另外,Lunasin能够上调受损关节软骨组织中自噬蛋白Beclin1以及LC-3Ⅱ的表达,抑制软骨细胞的凋亡蛋白Bax的表达. 结论 Lunasin能够通过降低炎性介质的产生、激活氧化应激系统以及自噬通路,促进受损关节的修复.
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大豆多肽Lunasin对类风湿关节炎大鼠T细胞免疫指标的影响
目的:探讨Lunasin对实验性类风湿关节炎(RA)大鼠免疫功能的影响.方法:Wistar雄性大鼠50只,按体重随机分为(n=10):对照组、模型组和3个Lunasin处理组(0.1,0.2,0.4 mg/kg灌胃).利用弗氏完全佐剂(FCA)局部注入大鼠足跖皮内,建立RA模型,治疗组Lunasin灌胃每天1次,对照组和模型组灌胃等量生理盐水;于实验第21天,检测足跖厚度、滑膜液T淋巴细胞活化情况和滑液中白介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子p(TNF-p)和IL-4、IL-10的分泌情况.结果:Lunasin可降低T淋巴细胞活化标志物CD69+和CD25+的表达,减少滑膜液中IL-12、TNF-β的分泌,增加IL-4、IL-10的分泌.结论:Lumasin能够抑制类风湿关节炎滑膜液中T细胞的活化并能反转Th1/Th2型细胞因子的分泌,调节类风湿关节炎免疫微环境.
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原核表达Lunasin的抗炎生物学活性鉴定及其对J774A.1细胞组织因子表达的影响
目的 检测原核表达Lunasin(露那辛)的抗炎生物学活性,为Lunasin今后在生物医药领域的开发奠定基础.方法 利用基因工程技术将PCR扩增得到的Lunasin DNA片段定向克隆至表达载体pET28,酶切及测序鉴定后对其诱导表达,利用镍离子亲和层析法对其进行纯化;Griess法和ELISA法检测小鼠J774A.1细胞培养液中Lunasin对一氧化氮和肿瘤坏死因子仅、白细胞介素6等炎症因子含量的影响;Western blot检测Lunasin对核因子κB(NF-κB) p65磷酸化以及组织因子(TF)表达的影响.结果 成功构建了Lunasin的原核表达载体,获得纯度达90％的Lunasin多肽.Lunasin能通过抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠J774A.1细胞NF-κB的活化而抑制一氧化氮合成以及下游基因肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达.Lunasin对LPS诱导的J774A.1细胞TF的表达也具有显著抑制作用.结论 原核表达的Lunasin表现出显著的抗炎生物学活性,明显抑制LPS诱导的J774A.1细胞TF表达,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化而实现的.
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多肽Lunasin的生物活性和药理作用研究进展Δ
目的：为多肽Lunasin的研究与开发提供参考。方法：以“生物活性肽”“药理作用”“Lunasin”为关键词，组合查询2009－2014年中国知网、PubMed等数据库中的相关文献，并对文献从Lunasin生物活性和药理作用两个方面分类整理后进行综述。结果与结论：共查询到相关文献46条，其中有效文献27条。Lunasin主要具有抗炎和抗氧化的生物活性，且已被证实具有相应药理作用。此外，其还具有明显的抗癌作用，可考虑用作一种皮肤癌、前列腺癌、结肠癌和乳腺癌的抑制剂。Lunasin来源于天然，具有毒副作用小、安全性高、不良反应小的特点，使其有可能成为一线抗癌药物。但目前对其部分氨基酸功能及三维结构仍不是很明确，是否还具有更多的生物活性和药理作用还有待进一步研究。
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Lunasin对实验性类风湿关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响
目的 探讨大豆多肽Lunasin对实验性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠滑膜成纤维细胞(synovial fibroblasts, SFs)增殖与凋亡的影响及可能的作用机制.方法 采用弗氏完全佐剂(freund's complete adjuvant,FCA)注入大鼠足跖皮内建立大鼠RA模型,造模成功后从大鼠关节滑膜组织中分离纯化出SFs,然后与不同浓度的Lunasin(0、50、100、200 μmol/L)分别孵育24、48和72 h,MTT法检测SFs增殖;RT-PCR、 Western blot检测Caspase3、 Bax、Bcl-2基因及蛋白的表达.结果 Lunasin可显著抑制体外培养的滑膜成纤维细胞增殖,增加Caspase3、Bax的表达,抑制Bcl-2基因和蛋白的表达,并呈现一定的时间和剂量依赖关系.结论 Lunasin对RA的治疗作用可能与其抑制SFs增殖和促进凋亡有关.
