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HepG_22.2.15细胞文献资料
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HBV S基因反义锁核酸抑制病毒体外复制
目的 探讨乙型肝炎病毒S基因反义锁核酸(LNA)片段在HepG_22.2.15细胞内的抗病毒效果及有效LNA片段筛选.方法 设计合成互补于HBV S基因mRNA翻译起始区同一位点的4条不同序列长度LNA片段,以阳离子脂质体介导,作用于HepG_22.2.15细胞株,采用ELISA法和实时荧光定量聚合酶链技术(FQ-PCR)分别监测24、48和72 h细胞培养上清液中HBsAg和HBV DNA的含量;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法监测细胞代谢.结果 4条不同序列长度反义LNA均显著抑制HBsAg表达和HBV DNA复制,72 h后高抑制率分别达72.43%和34.73%.HBsAg分泌量和HBV DNA的拷贝数均明显低于对照组(P<0.01).LNA对细胞代谢无明显影响.结论 针对HBV S基因mRNA翻译起始区的反义LNA片段体外能显著抑制HBV表达,且抑制作用强序列长度在15～25个碱基之间.
关键词： 乙型肝炎病毒 锁核酸 HepG_22.2.15细胞 基因治疗 阳离子脂质体
