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金黄色葡萄球菌分泌趋化抑制蛋白与C5aR、C5L2的相互作用
目的 探讨金黄色葡萄球菌分泌的趋化抑制蛋白(CHIPs)与G蛋白偶联受体(GPCR)C5a受体(C5aR)或促酰化蛋白受体(C512))的相互作用.方法 将纯化的CHIPs蛋白分别与表达C5aR、C5L2、CXC趋化因子受体3(CXCR3)的人肾胚胎上皮细胞293T分别孵育,用Western blot检测结合情况.结果 CHIPs蛋白与C5aR相结合,与C5L2和CXCR3尤明显结合.结论 C5aR是CHIPs蛋白的受体,提示C5L2与C5aR在和CHIPs的结合作用上存在明显差异.
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CHIPS教学理念在药理学教学中的探索和实践
为了加强高等医药院校人才素质的培养,通过CHIPS教学理念在药理学教学中的探索和实践,促进药理学教学理念的更新和教学质量的提高,从而培养具有创新精神、较强的动手能力和主动性的富有潜力的、服务于社会的药学人才.
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CHIPS教学理念在药理学教学中的应用
CHIPS是一种新型的培养教育模式,通过CHIPS培养模式不仅提高了药理学教师的教学业务水平,更是培养学生在药理学课程学习过程中的自学能力、科研思维和创新能力.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌CHIPS基因的克隆、序列分析及原核表达
目的 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础.方法 根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增CHIPS基因,纯化DNA进行EcoRI、XhoI双酶切鉴定及测序鉴定,并将CHIPS亚克隆入表达载体PET-28α,转化感受态大肠杆菌BL21,对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导表达重组蛋白,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证重组蛋白的表达.结果 以金黄色葡萄球菌临床儿童分离株基因组为模板,成功扩增CHIPS基因,基因大小为450bp；重组PET-28a(+)-CHIPS双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示CHIPS在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.98％.经IPTG诱导后,pET-28a(+)-CHIPS/BL21在相应分子量(17kDa)可见融合蛋白在上清表达,免疫印迹检测到目的蛋白.结论 成功从儿童分离株MRSA中构建了CHIPS的原核表达系统,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为后续的疫苗研究奠定基础.
