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KLF9基因腺病毒载体的构建及其抗ROS功能
目的 构建及鉴定KLF9基冈过表达的腺病毒载体,初步研究KLF9在对抗反应活性氧方面的功能.方法 克隆KLF9过表达质粒,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,Pme Ⅰ酶切线性化,转化E.coli.BJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌,产生重组腺病毒载体.重组载体经过卡那霉素抗性筛选和限制性内切酶分析确认重组后,再用Pac Ⅰ线性化重组质粒,回收,转染293A细胞,7～12d包装产生病毒颗粒.利用H2O2和过表达KLF9的腺病毒处理体外培养的C57 BL/6J小鼠原代肝脏细胞,实时定量PCR检测KLF9和抗ROS基因(CAT、SOD2和GPx1)的表达.结果 H2O2可以刺激C57BL/6J小鼠原代肝脏细胞KLF9和抗ROS基因的表达上调(P＜0.05).定量PCR以及Western blot结果显示成功包装过表达KLF9腺病毒,感染效率达90％以上.过表达KLF9可以上调抗ROS基因的表达水平(P＜0.05).结论 初步认定KLF9基因可参与C57 BL/6J小鼠原代肝脏细胞中抗ROS基因的调节.
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KLF9在浸润性乳腺癌细胞中的表达研究
目的 观察KLF9在乳腺癌细胞中的表达,探讨其对浸润性的影响. 方法 采用细胞侵入和迁移实验分离浸润性乳腺癌细胞,抽提RNA,利用实时定量聚合酶链反应检测浸润性和非浸润性乳腺癌细胞KLF9基因表达量,并观察乳腺癌组织和癌旁组织中KLF9表达量及其与细胞贴壁的关系. 结果 乳腺癌浸润性细胞系中KLF9表达量下调. 过表达KLF9使乳腺癌细胞浸润性降低,同时浸润性细胞形态发生变化. KLF9基因在乳腺癌组织中表达下调,且表达水平与细胞贴壁有关. 结论 KLF9表达下调与乳腺癌相关,为乳腺癌浸润与迁移的研究提供了基础.
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Kruppel样转录因子9在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨Kruppel样转录因子9(KLF9)在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义.方法 搜集63例具有完整临床病理资料及5年以上随访资料的石蜡包埋上皮性卵巢癌组织及正常卵巢上皮组织,采用荧光定量PCR技术检测KLF9 mRNA在上皮性卵巢癌及正常卵巢组织中的表达水平,应用免疫组化法分析KLF9在上皮性卵巢癌组织和正常卵巢组织的表达情况,分析KLF9表达水平与临床病理参数和患者预后的关系.结果 63例癌组织中KLF9 mRNA的表达值为(0.597±0.332)显著低于正常卵巢组织中KLF9 mRNA的表达(1.354±0.471),差异有统计学意义(P＜0.01).上皮性卵巢癌组织中KLF9高表达15例(23.8％),低表达48例(76.2％);在正常卵巢组织中KLF9高表达18例(60.0％),低表达12例(40.0％),差异有统计学意义(P＜0.01).癌组织中KLF9低表达与上皮性卵巢癌患者的临床分期、淋巴结转移、腹腔积液明显相关(P＜0.05).KLF9mRNA高表达组中位生存时间46.8个月(95％ CI:26 ～83个月)显著高于低表达组32.6个月(95％ CI:12～74个月),差异有统计学意义(JP＜0.01).肿瘤组织中KLF9阳性细胞高表达组的中位生存时间为50.2个月(95％ CI:32 ～84个月)明显高于KLF9低表达组31.1个月(95％ CI:12～79个月),差异有统计学意义(P＜0.01).Cox多重回归分析表明KLF9 mRNA和KLF9阳性细胞低表达是影响上皮性卵巢癌预后不良的独立指标.结论 KLF9在上皮性卵巢癌组织中表达下调,与上皮性卵巢癌患者预后不良相关.
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KLF9和 KLF15在维吾尔族网膜脂肪中的表达及其与炎症相关性分析
目的：检测维吾尔族网膜脂肪组织KLF9及KLF15 mRNA表达水平，分析KLF9、KLF15与炎症信号通路关键因子的相关性。方法：选取维吾尔族个体NC组50例、OB组45例，检测一般资料和生化指标。采集网膜脂肪组织，RT-PCR法检测KLF9、KLF15及NF-κB炎症信号通路关键因子mRNA表达水平。结果：OB组BMI、WC、HC、WHR、TG和LDL显著高于NC组，差异有统计学意义（ P＜0.05）。维吾尔族网膜脂肪组织中，OB组NF-κB、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平显著高于NC组（P＜0.05），NF-κB mRNA表达与体重和TG显著正相关（P＜0.05），TNF-αmRNA表达与TG和TC显著正相关（P＜0.05）， IL-6 mRNA表达与HC、TG和LDL显著正相关（ P＜0.05）；OB组网膜脂肪组织KLF15 mRNA表达水平显著低于NC组（ P＜0.05），与BMI、WC、WHR显著负相关（ P＜0.05），与HDL正相关，与TG负相关。 KLF9 mRNA表达水平高于NC组，与NF-κB显著正相关（ P＜0.01），与IL-6正相关。结论：KLF15可能通过调控脂代谢发挥抗炎作用；肥胖状态下脂代谢紊乱可能间接上调KLF9的表达，而KLF9作为转录激活因子可能通过调控下游炎症因子的转录活性，从而促进炎症因子的表达和释放。
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卵巢浆液性/黏液性囊腺癌中SP1、KLF9的表达及与HPV16/18感染的相关性研究
目的 探讨KLF9、SP1及HPV16/18在卵巢浆液性/黏液性囊腺癌中的表达及临床意义,并进一步探讨三者在浆液性/黏液性卵巢癌发生、发展过程中的作用.方法 制作组织芯片并采用免疫组化SP法及分子原位杂交技术检测60例卵巢浆液性/黏液囊腺癌组织及20例卵巢浆液性/黏液性囊腺瘤组织中KLF9、SP1和HPV16/18的表达情况,分析三者与临床病理特征的关系,并检验三者之间的相关性.结果 SP1、KLF9及HPV16/18在卵巢浆液性/黏液性囊腺癌组织中的阳性表达率分别为71.7%(43/60)、63.3%(38/60)、30.0%(18/60),而三者在卵巢浆液性/黏液性囊腺瘤组织中分别为15.0%(3/20)、10.0%(2/20)、0(0/20),差异均有统计学意义(P<0.01).KLF9表达与各临床病理特征均无关(P>0.05);SP1表达与临床分期有关(P<0.05);HPV16/18表达与分化程度有关(P<0.05).在卵巢浆液性/黏液性囊腺癌组织中KLF9与SP1的表达呈正相关(r=0.443,P=0.000),HPV16/18与SP1的表达亦呈正相关(r=0.331,P=0.010),KLF9与HPV16/18的表达无相关性(P=0.133).结论 KLF9、SP1及 HPV16/18在卵巢浆液性/黏液性囊腺癌组织中高表达,可能与卵巢浆液性/黏液性囊腺癌的生物学行为有关,在浆液性/黏液性卵巢癌的发生、发展中起重要的促进作用.
关键词： 卵巢浆液性/黏液性囊腺癌癌 Sp1 KLF9 HPV16/18 -
KLF9在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨Krüppel样转录因子9(KLF9)在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义.方法 选取63例有完整临床病理资料及随访＞5年的石蜡包埋上皮性卵巢癌组织和正常卵巢上皮组织.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测KLF9 mRNA在两组卵巢组织中的表达,应用免疫组织化学法分析KLF9在两组卵巢中的表达,分析KLF9表达水平与临床病理参数及患者预后的关系.结果 63例卵巢癌组织中,KLF9 uRN为正常上皮组织的(0.44±0.693)倍(P＜0.05).上皮性卵巢癌组织中,KLF9高表达15例(23 8％),低表达48例(76.2％);在正常卵巢组织中,KLF9高表达18例(60％),低表达12例(40％),差异有统计学意义(P＜0.05).癌组织中KLF9低表达与上皮性卵巢癌患者的临床分期、淋巴结转、腹腔积液相关(P ＜0.05).KLF9 mRNA高表达组中位生存时间46.8个月(95％CI:26,83),高于低表达组的32.6个月[(95％CI:12,74),P=0.002].肿瘤组织中KLF9阳性细胞高表达组的中位生存时间为50.2个月(95％CI:32,84),高于KLF9低表达组的31.1个月[(95％CI:12,79),P=0.001].多因素COX生存分析表明,KLF9 mRNA和KLF9阳性细胞低表达是影响上皮性卵巢癌预后不良的独立指标[HR=2.64(95％CI:1.14,3.56),P=0.017]和[HR=3.01(95％CI:2.19,4.51),P=0.010].结论 KLF9在上皮性卵巢癌组织中表达下调,与上皮性卵巢癌患者预后不良相关.
