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阿片类毒品对HIV-1感染者PBMCs中TLR9基因表达的影响
探讨滥用阿片类毒品(Opiates)对Ⅰ型艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中TLR9基因表达水平的影响,为阐明阿片类毒品促进HIV-1复制的作用机制奠定基础.首先在南宁、柳州、钦州市地区的美沙酮、艾滋病自愿咨询检测门诊招募对象,经研究对象知情同意,分为4组,即阿片类毒品滥用的HIV-1感染组(Opiates HIV(+)组)、阿片类毒品滥用非HIV-1感染组(Opiates HIV(-)组)、非阿片类毒品滥用的HIV感染组(Non-opiates HIV(+)组)和健康对照组(Control组),每组随机招募50人.其次,以问卷形式调查对象的人口学特征,并采集其外周静脉血,分离出PBMCs后提取RNA.后采用qPCR、蛋白质印迹法(Western blot,WB)法检测4组人群PBMCs中TLR9的mRNA、蛋白表达水平.经调查发现4组人群在年龄、性别、民族、户籍所在地、婚姻状况、文化程度和吸毒年限等人口学特征方面差异均无统计学意义(P＞0.05).Opiates HIV(+)与Non Opiates HIV(+)组病毒载量中位数分别为4.450×103和3.977×103 cp/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).TLR9 mRNA相对表达量在Opiates HIV(+)、Non-Opiates HIV(+)、Opiates HIV(-)和Control组中分别为(2.13±1.59)×10-3、(3.66±2.22)×10-3、(1.96±1.42)× 10-3和(7.66±4.87)×10-3.阿片类毒品滥用和HIV感染对TLR9的表达存在交互作用(F=25.91,P=0.000).经单独效应分析,HIV阳性与阴性人群中,阿片类毒品滥用者TLR9相对表达量均明显低于非毒品滥用者(P＜0.05);在吸毒人群中,HIV阳性者与HIV阴性者两组间差异没有统计学意义(P＞0.05);在不吸毒人群中,HIV阳性者低于正常组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).WB的结果显示,Opiates HIV(+)、Non-Opiates HIV(+)、Opiates HIV(-)三组TLR9蛋白的表达量均低于Control组.上述结果表明阿片类毒品能够下调HIV-1感染者PBMCs中TLR9的表达水平,提示阿片类毒品可能通过影响TLR9所介导的机体免疫效应,进而促进HIV-1的感染复制.
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海洛因依赖者神经-内分泌-免疫功能损伤
海洛因,亦称盐酸二乙酰吗啡,其主要成分为二乙酰吗啡,是目前滥用流行广泛、对人体影响严重的阿片类毒品.海洛因依赖者则是因长期滥用海洛因而引起生理、心理综合受创的特殊群体.海洛因吸食带来的短暂欣快感是导致吸食者不断吸毒的重要驱动因素;一旦对毒品形成依赖,骤然停药就会产生无法忍受的戒断症状,因此很难戒除;即使成功消除戒断症状,但"心瘾"未除,也会导致复吸的发生.已证实,戒断症状是产生心瘾而终导致复吸的常见原因,而海洛因依赖者戒断症状又与神经、内分泌、免疫系统均有一定关系[1],因此,研究海洛因依赖者神经、内分泌、免疫系统损伤原因及三大系统间相互影响的关系对复吸的防治有重要意义.
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吸食毒品人员及成瘾情况的调查与分析
目的:了解上海市某区吸毒成瘾认定门诊的吸毒人员毒品滥用及成瘾状况. 方法:对吸毒成瘾认定门诊的4 856例吸毒者一般人口学资料及吸毒种类进行调查,并进行阳性和阴性症状量表(PANSS)、安非他命类药物戒断症状自制评估表、以及阿片类药物戒断症状量表(COWS)评估,结果分别使用t检验及Logistic回归分析,比较被认定或暂不被认定吸毒成瘾组之间的差异. 结果:接受认定吸毒者所涉及的毒品种类包括冰毒、吗啡、氯胺酮、大麻、可卡因、摇头丸等,其中涉及冰毒共4 689例,占认定总数的96.6％.被认定吸毒成瘾比率为57.2％(2 779例),暂不被认定吸毒成瘾者吸毒比率42.8％(2 077例);被认定吸毒成瘾组PANSS总分、阳性症状、阴性症状以及精神病理评分(t=28.139,t=17.151,=16.469,￡=43.087;P均＜0.001)、安非他命类药物戒断症状自制评估分(t=67.483,P＜0.001)以及COWS评分(t=7.916,P＜0.001)均显著高于暂不被认定吸毒成瘾组. 结论:门诊接受吸毒认定者使用的毒品以冰毒为主,半数以上吸毒者被认定吸毒成瘾;吸毒成瘾者具有更明显的精神症状及戒断症状.
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GC、GC-MS 法定性定量法检测血液和尿液中阿片类毒品及其代谢物的含量
目的：建立检测血液、尿液中阿片类毒品及其代谢物含量的气相色谱（GC）法或气-质联用（GC-MS）法。方法尿样或血样中的阿片类毒品，加0．1 mol／mL （pH＝6）磷酸缓冲溶液调节 pH 为5～6，将样品添加于固相萃取柱（SPE），用去离子水和0．1 mol／mL HCl 淋洗，再次用 CH3 OH 洗涤 SPE 柱子，由含2％氨水的 CH2 Cl2／CH3 CH2 OHCH3混合液萃取提取，吹干，用 BSTFA＋TMCS（99∶1）试剂衍生化，以 SKF-525a 作为内标，利用色谱柱为 DB-5MS 的 GC、GC-MS 仪选择离子（m／z）扫描模式（SIM）和全扫描（Full Scan）模式进行测试分析。结果海洛因、吗啡、可待因、6-乙酰吗啡、6-乙酰可待因、乙基吗啡在25～400 ng／mL 范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数 r ＞0．9907，平均加内标回收率为95．9％～101．6％，相对标准误差（RSD）为2．13％～8．59％，低检测限（LOD）为1 ng／mL，低定量限（LOQ）为25 ng／mL。案件样品尿液检测出可待因、吗啡成分、6-乙酰吗啡成分，可待因含量＞400 ng／mL，吗啡为384 ng／mL，6-乙酰吗啡为278 ng／mL，血液检测量极小，确证了吸食海洛因的违法事实。结论本方法简单、快速、灵敏度高、准确定性定量，适用于吸毒或毒品滥用者血样、尿样的筛查与确认试验。
