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两种品系小鼠建立登革病毒感染的湿热证模型研究
目的 建立两种不同品系小鼠登革病毒感染的湿热证模型,并比较感染情况差异,确定适合造模的小鼠.方法 根据中医温病湿热证的造模方法,采用复合因素:高糖高脂饲料加高温舱加感染因子(登革病毒),分别处理BALB/C和C57BL/6小鼠,同时设正常对照组(对照组)、病毒组(单纯病毒感染造模)、湿热组(单纯湿热条件干预造模),通过观察小鼠的体温、血小板数量、分离血清中病毒、肝脏病理学改变及血清学指标比较模型建立的情况.结果 造模后小鼠于高温舱处理时出现低热.与对照组比较,BALB/C模型组血小板降低,两种小鼠模型组和病毒组血清AST均升高,BALB/C模型组、湿热组血清TC、TG升高,差异有统计学意义(P＜0.05).各组肝组织均有不同程度的病理改变,以BALB/C模型组病变严重.用Real-time PCR检测造模后血清病毒滴度,各组无明显差异,病毒含量2.9×104～5.5×104拷贝数/mL.结论 初步构建登革病毒感染的湿热证小鼠模型,比较BALB/C 和C57BL/6小鼠感染情况,BALB/C更适合造模.
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湿热证大鼠模型的复制及三仁汤对其影响的实验观察
目的:复制大鼠湿热证模型.方法:采用多因素复合造模法.以饮食失调造成内湿环境,以提高空气温度与湿度,外加感染鼠伤寒杆菌模拟外感湿热病邪,内外合邪造模.结果:造模大鼠体温、饮食量、饮水量、尿量、体重、二便、舌象、精神状态出现变化,符合湿热证的特点,舌、肠、肝、脾也出现病理变化,运用三仁汤治疗有效.结论:用以上方法可成功地复制湿热证模型.
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小鼠流感病毒性肺炎湿热证模型建立
目的 建立小鼠流感病毒性肺炎湿热证模型,为中药应用于湿热证治疗提供模型基础.方法 将小鼠随机分为正常组、病毒组(单纯病毒感染造模)、模型组(肥甘饮食+湿热环境+病毒感染).采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠肺病毒含量.并与正常组、病毒组小鼠进行肛温、血脂、肺病变程度等方面的比较.结果 正常组、病毒组、模型组小鼠的体重分别为(21.5±0.91),(19.44±1.55),(22.16±0.94)g,模型组高于正常组、病毒组,差异有统计学意义(P<0.05);小鼠肛温分别为(35.8±0.4),(35.6±0.3),(36.6±0.4)℃,模型组温度增高(P<0.05).此外模型组血脂亦较其他2组升高明显.模型组、病毒组的肺指数和肺病变程度和正常组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 该模型无论发病条件、病变程度,还有主要症状体征均近似于中医湿热证型,操作简单,重复性好,有较高的应用价值.
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温病湿热证动物模型中炎症因子与水通道蛋白表达的实验研究
目的:采用复合多因素造模法,给予小鼠肥甘饮食、酒伤、劳役等方法并加以湿热外环境以建立湿热证小鼠模型,探讨湿热证中炎症反应与AQP之间的关系.方法:将40只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、脂多糖(LPS)组、湿热组、脾虚组,观察小鼠日常活动以及体征,测量小鼠每周体质量变化,采用HE染色检测舌部病理形态学变化.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中LPS和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;免疫组化法检测结肠组织中核转录因子κBp65(NF-κBp65)、Toll样受体4(TLR4)、水通道蛋白质(AQP)3和水通道蛋白质(AQP)4的阳性表达.结果:与正常组相比,LPS组、湿热组、脾虚组中LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4、AQP3的表达升高(P ＜0.001),AQP4的表达下降(P ＜0.001);与LPS组相比,湿热组、脾虚组LPS、TNF-α的含量下降(P ＜0.001),湿热组NF-κBp65、AQP4的表达升高(P＜0.05),脾虚组TLR4、AQP3、AQP4的表达升高.结论:湿热证小鼠LPS、TNF-α、NF-κBp65、TLR4的水平增高与水通道蛋白AQP3、AQP4关系密切,而LPS的在其中的机制有待进一步深入研究.
