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酸枣仁皂苷A人工抗原的制备及鉴定
采用高碘酸钠氧化法首次合成酸枣仁皂苷A(jujuboside A)人工抗原,利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)鉴定酸枣仁皂苷A人工抗原偶联成功,通过酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫小鼠血清中抗酸枣仁皂苷A抗体效价及其特异性.竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与酸枣仁皂苷A产生特异性结合,血清抗体效价在1∶4000.成功合成的酸枣仁皂苷A人工抗原,为酸枣仁皂苷A单克隆抗体的制备及研究酸枣仁皂苷A在机体内的药物代谢过程奠定了基础.
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梓醇人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
基于单克隆抗体的免疫分析方法具有高特异性、高灵敏性等特点,在中药的质量控制和动物体内微量成分的检测等方面均具有重要的意义,该方法建立的前提条件就是成功制备中药活性小分子化合物的人工抗原.该研究采用高碘酸钠氧化法,首次制备了梓醇的人工抗原,通过基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)和分子排阻色潽法鉴定梓醇与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功,用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗梓醇抗体效价在1∶8000以上,成功制备梓醇的人工抗原,为下一步单克隆抗体的制备和相关免疫方法的建立奠定基础.
关键词： 梓醇 人工抗原 免疫分析法 基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法 分子排阻色潽法 -
马钱苷人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
目的 首次合成并鉴定马钱苷(loganin)人工抗原,为进一步制备马钱苷单克隆抗体,建立相关免疫分析方法奠定基础.方法 采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原(loganin-BSA)和包被原(loganin-OVA);应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功;通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性.结果 经MALDI-TOF-MS检测,马钱苷与BSA偶联成功.竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合,血清抗体效价在1:40 000.结论 成功合成了马钱苷人工抗原,为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础.
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珠海地区9775例新生儿常见耳聋基因突变筛查结果分析
目的 了解珠海地区新生儿常见耳聋基因突变携带率、突变类型,为大规模开展耳聋基因筛查提供临床依据.方法 选择中国人群常见4个耳聋基因(GJB2、GJB3、SLC26A4和12SrRNA)20个突变位点,采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)对9775例无耳聋家族史的新生儿进行常见耳聋基因突变检查.结果 9775例新生儿中检出耳聋基因突变406例,携带率为4.2%.其中单基因单杂合突变402例,GJB2基因突变197例(携带率2.02%,),SLC26A4基因突变153例(携带率1.57%),GJB3基因突变29例(携带率0.30%),12SrRNA基因突变23例(携带率0.24%).另单基因复合杂合突变2例,双基因复合杂合突变2例.检出突变位点18个,检出率高的是GJB2的235delC突变位点,共检出164例(164/406,40.39%),其次是SLC26A4基因的IVS7-2A>G位点,99例(99/406,24.38%).结论 珠海地区新生儿常见耳聋基因突变携带率较高,开展新生儿耳聋基因筛查有助于耳聋的早期防治.
关键词： 耳聋基因 新生儿 基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法 -
珠海地区孕妇常见耳聋基因突变筛查分析
目的 了解珠海地区孕妇常见耳聋基因突变携带率、突变类型,减少耳聋患儿出生.方法 选择中国人群常见耳聋基因(GJB2、GJB3、SLC26A4、TMC1及12S rRNA)20个突变位点,采用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱检测技术对1 152例孕妇进行常见耳聋基因突变检测.结果 1 152例孕妇中检出耳聋基因突变61例,携带率为5.3％.GJB2基因突变29例(29/61,47.5％),SLC26A4基因突变21例(21/61,34.4％)(包括15例单杂合突变及6例复合杂合突变),GJB3基因突变3例(3/61,4.9％),12SrRNA基因突变8例(8/61,13.1％).检出突变位点12个,检出率高的是GJB2的235delC突变位点,共检出23例(23/61,37.7％),其次是SLC26A4基因的IVS7-2A＞G位点,共检出12例(12/61,19.7％)(包括8例单杂合突变及4例复合杂合突变).结论 珠海地区孕妇常见耳聋基因突变携带率较高,以GJB2及SLC26A4基因突变常见.在孕妇中开展耳聋基因筛查,可减少耳聋患儿出生.
关键词： 耳聋基因 产前筛查 基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法
