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中国部分地区人群和动物中肠出血性大肠埃希菌O157∶H7分布特征
自20世纪90年代以来,中国大部分省、市、自治区相继开展了人群和动物的肠出血性大肠埃希菌O157∶H7病原监测.监测结果显示:①在不同的地区和时间,人群中O157∶H7的感染率/带菌率不同;②动物中O157∶H7的带菌率存在地区、时间及种群的差异;③人群O157∶H7的感染与动物带菌存在关联.提示,加强人群和动物的病原监测、揭示O157∶H7在人群和动物中的流行规律、降低动物的感染或带菌率对预防与控制人群肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的感染具有重要意义.
关键词： 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 病原监测 分布 -
肠出血性大肠埃希菌O157∶H7外膜蛋白A的表达、鉴定和纯化
目的 构建肠出血性大肠埃希菌O157∶H7外膜蛋白A基因重组质粒,研究其在大肠埃希菌中的表达情况. 方法 用RT-PCR法从肠出血性大肠埃希菌O157∶H7菌株克隆OmpA基因,构建重组质粒pET-30a (+)-OmpA,经双酶切及基因测序鉴定后在E.coli BL21(DE3)原核表达系统中诱导OmpA的表达,通过蛋白质电泳技术检测蛋白的表达,用Western blot法测定和分析免疫反应性. 结果 获得的目的 基因为1 041 bp,与预期值相符,测序结果与GenBank公布序列的同源性达100%,重组质粒pET-30a (+)-OmpA在原核系统下可表达OmpA, Western blot分析His-Tag单抗能与OmpA(His-Tag)发生免疫反应. 结论 OmpA重组质粒构建成功,表达产物具有抗原性.
关键词： 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 外膜蛋白A 重组质粒 原核表达 -
2012年东台市肠出血性大肠埃希菌O157∶H7监测分析
目的 了解肠出血性大肠埃希菌O157∶H7在东台市动物宿主和腹泻患者中带菌及毒力基因携带与耐药情况. 方法 于流行季节采集动物宿主、腹泻患者粪便及生熟食品和苍蝇标本,mEC肉汤增菌后,用特异性免疫磁珠集菌、科玛嘉显色平板分离,纯化的菌株经生化鉴定,血清分型,以KB纸片法进行药敏试验,采用PCR方法检测uida基因和stx1、stx2、eaeA、hly等4种毒力基因. 结果 683份标本共检出O157∶H7菌株35株,检出率为5.12％,其中动物粪便检出率为10.59％(34/321),检出率高的为牛粪(26.92％),其次为山羊粪(7.50％)和猪粪(7.32％),腹泻患者的检出率为0.39％(1/256).35株菌株均检出eaeA和hly毒力基因,而牛粪中stx2、eaeA和hly等3种毒力基因组合型检出率达12.82％. 35株菌株对氨苄西林敏感率为14.3％,对其余17种抗生素敏感率均＞90％. 结论 东台市动物宿主和腹泻患者均不同程度携带肠出血性大肠埃希菌O157∶H7,且存在流行的潜在危险.
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湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7
目的:为了解肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)在我省的动物宿主种类和菌型特征,制定相应流行病防治对策.方法:采用传统方法,在6～10月份肠道传染病高发季节,对武汉市3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样,共采集811份样品,进行EHEC O157∶H7检测.结果:341份猪粪样品中检出1株EHEC O157∶H7,阳性率为0.29%;255份奶牛粪便样品中检出7株EHEC O157∶H7,阳性率为2.75%;其他类标本中未检出.分离的这8株阳性菌株与传统的EHEC O157∶H7存在许多不同之处,它们均发酵山梨醇,大部分菌株不分解棉子糖,也存在不分解卫茅醇的菌株,而β-葡萄糖醛酸酶试验均为阳性.在致病因子上,检测现有的几种毒力基因均为阴性.结论:在我省首次检出8株EHEC O157∶H7,说明其普遍存在于动物体内,对环境、食品构成较大威胁.
关键词： 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 牛粪 猪粪 分离 -
一种肠出血性大肠埃希菌O157∶H7鞭毛抗原检测新方法
目的评价抗-H7血清琼脂方法对大肠埃希菌O157∶H7鞭毛抗原的检测效果.方法采用抗-H7血清琼脂法对来自人、动物、环境水和食品中的109株疑似O157∶H7菌株进行H7鞭毛抗原鉴定,并设鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株,同时与试管凝集法和H7特异性基因聚合酶链反应(PCR)法进行比较.结果 3种方法对鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株的检测结果均成立,抗-H7血清琼脂法与试管凝集法比较其敏感性、特异性和符合率均为100%;而与H7特异性基因PCR法比较其敏感性、特异性和符合率分别为93.75%、95.31%和97.25%.结论抗-H7血清琼脂法是简便快速、稳定可靠的H7鞭毛抗原鉴定方法,具有推广使用价值.
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7黏附HeLa细胞模型的建立
目的 建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础.方法 以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到佳条件,后肌动蛋白荧光染色(FAS)试验鉴定模型.结果 加入细菌为1×105 CFU,细菌与细胞孵育4 h时,黏附细胞的数量佳,FAS检测发现该条件下细菌能够引起细胞特异性黏附、擦拭(attaching & effacing, A/E) 损伤,模型建立成功.结论 成功建立O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制提供了条件.
关键词： 肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 细胞模型 Hela细胞
