马尾松树皮提取物体外诱导肺腺癌GLC-82细胞凋亡的机制

目的:探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniara bark extract,PMBE)在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞生长的机制.方法:通过CCK-8法分析了PMBE对GLC-82细胞的生长活力影响;AO/EB染色、透射电镜和流式细胞术检测了PMBE诱导的肺腺癌细胞GLC-82的凋亡;Western blot检测PMBE处理GLC-82细胞后caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bcl-2和Bid蛋白表达水平的变化.结果:PMBE在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞的生长具有时间和剂量依赖性;通过荧光显微镜、透射电镜和流式细胞术证实PMBE诱导了GLC-82细胞的凋亡;细胞周期分析结果说明PMBE可以显著减少S期的GLC-82细胞;免疫杂交发现PMBE可以诱导caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的激活,并下调Bcl-2和Bid蛋白的表达.结论:PMBE可能通过激活caspase-8从而激活Bid蛋白,进一步激活caspase-9来诱导肺腺癌GLC-82细胞的凋亡.

新疆紫草提取物对GLC-82人肺腺癌细胞的体外作用

目的:研究不同浓度的紫草提取物(SE)对体外培养的GLC-82人肺腺癌细胞(简称“GLC-82细胞”)的作用.方法:荧光显微镜观察细胞形态的变化；MTT法检测不同浓度SE培养细胞后细胞的存活率；划痕试验检测不同浓度的SE对细胞迁移力的影响；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果:SE诱导细胞凋亡程度与用药剂量呈正相关,较高剂量的药物能引起GLC-82细胞亚结构发生变化,如呈现边界不清,体积缩小,核固缩,染色质凝集、边缘化,甚至细胞发生破碎,凋亡小体形成；随着SE浓度的增高GLC-82细胞向划痕区的愈合速度不断减慢；SE的浓度≥3mg/mL时,细胞周期主要表现为G1期比例的上升伴随S期比例的下降.结论:高剂量SE能够诱导GLC-82细胞凋亡及周期的改变,为临床上用药剂量提供一定的依据.

烟酰胺增强非聚焦超声杀伤GLC-82肺腺癌细胞系

目的 研究烟酰胺对非聚焦超声杀伤培养的GLC-82肺腺癌细胞的增敏作用.方法 实验分A(空白对照)组,B(NA单独作用)组,C(NFU单独作用)组,D(NA增敏NFU作用)组;MTT法测细胞的存活率;增敏比(SER)参数分析增敏作用;荧光显微镜及扫描电镜观察细胞形态结构;流式细胞术测细胞周期和凋亡率.结果 NA对GLC-82细胞的抑制及NFU的增敏作用均呈剂量依赖性;经NA与NFU共同作用24 h后细胞凋亡小体形成,表面的微绒毛和丝状结构明显减少,其细胞的凋亡指数高于烟酰胺及非聚焦超声单独作用组,并使细胞阻滞于S和G2期.结论 一定浓度的NA对NFU杀伤悬液中培养的GLG-82肺腺癌细胞具有增敏作用,能够显著地提高NFU的杀伤效果.

二氧化硒对GLC-82肺癌细胞株C-FOS蛋白表达的影响

目的:本研究通过观察不同浓度的二氧化硒(SeO2)对GLC-82肺癌细胞株C-FOS蛋白表达的影响,初步探讨SeO2致肺癌细胞损伤的机制.方法:把GLC-82细胞分别接种于3个6孔板中,同时在每个孔中放置4片盖玻片后;于37℃、5%CO2下培养爬片24h,分别加SeO2,使每个板5个孔SeO2的浓度分别为3,10,30μM,而每板保留1个孔作为空白对照.分别在1h、6h、12h和24h捞片.100%丙酮固定后,进行SP法的C-FOS蛋白免疫组化染色.在光镜10×40倍视野下,应用CMIAS-H图像分析仪对阳性细胞的图像学参数进行分析,后结果经Spss8.0统计软件统计分析.结果:SeO2在早期(1h)即可引起C-FOS蛋白表达增强,随后逐渐增强,在6～12h时GLC-82细胞C-FOS均呈明显的高表达(P＜0.05和P＜O.01),随后降低,其表达时相、强度与SeO2剂量有关.结论:SeO2可引起GLC-82细胞C-FOS蛋白的高表达,提示C-FOS可能参与SeO2致肺癌细胞损伤过程,且具有一定的时相、剂量效应关系.

Objective: To study the effect of electromagnetic pulse (EMP) on apoptosis of human lung carcinoma cell line GLC-82. Methods: The injury changes in GLC-82 cells after irradiated by EMP (electric field intensity was 60 kV/m with 5 pulses/2 min) were analyzed by cytometry, MTT chronometry and flow cytometry. The immuno- histochemical SP staining was used to determine the expressions of bcl-2 protein and p53 protein. The stained positive cells were analyzed by CMIAS-II image analysis system at a magnification 400. All data were analyzed by SPSS8.0 software. Results: EMP could obviously inhibited lung carcinoma cell line GLC-82 proliferation and increased the number of non-adherent cells. The absorbance value (A570) of MTT decreased immediately, at 0 h, 1 h and 6 h after the GLC-82 cells irradiated by EMP as compared with control group. The highest apoptosis rate was found to reach 13.38% by flow cytometry at 6 h after EMP irradiation. Down-regulation of bcl-2 expression and up-regulation of bax expression were induced by EMP. Conclusion: EMP promoted apoptosis of GLC-82 cells. At same time, EMP can down-regulate bcl-2 expression and up-regulate p53 expression in GLC-82 cells. The bcl-2 and the p53 protein may involve the apoptotic process.

非聚焦超声对溶液中GLC-82肺腺癌细胞损伤的实验研究

目的:探讨不同功率及不同作用时间的非聚焦超声(none focused ultrasound,NFU)对溶液中肺癌细胞的作用,为杀灭弥漫在胸水及腹水中或浸润在组织中的癌细胞提供实验依据.方法:台盼蓝拒染法测NFU辐照GLC-82肺腺癌细胞后细胞的即刻存活率,MTT法检测其作用后24 h细胞的增殖率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果:(1)GLC-82细胞的即刻存活率随着辐照功率和作用时间的不断增加明显下降;(2)超声辐照24 h后,随着超声辐照时间和剂量的不断增加,细胞的增殖率明显下降,时间-效应各组之间、剂量-效应各组之间细胞的增殖率差异均有显著性(P＜0.05);(3)超声辐照细胞的凋亡率均高于阴性对照,但其周期即刻未发生明显变化.结论:NFU能杀伤溶液中GLC-82肺癌细胞并抑制其增殖,较低功率的超声可能以诱导细胞凋亡为主,较高功率时则可能以杀伤细胞为主.超声对细胞周期的影响为迟发性效应.

烟酰胺对GLC-82人肺腺癌细胞的体外作用

目的 研究不同浓度的烟酰胺对体外培养的GLC-82肺腺癌细胞的作用.方法 荧光显微镜观察细胞形态的变化;MTT法检测不同浓度烟酰胺培养细胞后细胞的存活率;划痕试验检测不同浓度的烟酰胺对细胞愈合力的影响;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 烟酰胺诱导细胞凋亡程度与用药剂量呈正相关,较高剂量的药物能引起GLC-82肺腺癌细胞呈现边界不清,体积缩小,核固缩,染色质凝集、边缘化,甚至细胞发生破碎,凋亡小体形成;随着烟酰胺浓度的增高GLC-82细胞向划痕区的愈合速度不断减慢;烟酰胺的浓度大于等于3mg/ml时,细胞周期主要表现为G1期比例的上升伴随S期比例的下降.结论 高剂量烟酰胺能够诱导GLC-82细胞凋亡及周期的改变,为临床上用药剂量提供一定的依据.

二氧化硒对肺癌细胞株GLC-82 端粒酶活性的影响

目的:探讨二氧化硒对肺癌细胞株GLC-82端粒酶活性的影响.方法:用TRAP-PCR-ELISA法检测不同浓度(3,10,30 μmol*L-1) SeO2作用不同时间后( 24、48 and 72 h)GLC-82细胞端粒酶活性的变化.结果:不同浓度SeO2与GLC-82细胞共育24、48和72 h时,即可明显抑制端粒酶活性,而且抑制作用呈明显的剂量依赖性(3,10,30 μmol*L-1)和时间依赖性关系.结论:SeO2可明显抑制GLC-82细胞端粒酶活性.