首页 > 文献资料
-
冠状病毒的生物学特性
冠状病毒属于巢状病毒目,冠状病毒科,冠状病毒属.成熟的冠状病毒直径约为60 nm～220 nm,电镜下呈日冕状或皇冠状,故命名为冠状病毒,分为3个抗原群:第Ⅰ群:猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸道冠状病毒、犬冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猫肠炎冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、人冠状病毒229E(HCoV-229E);第Ⅱ群:大鼠冠状病毒、大鼠涎泪腺炎病毒、牛冠状病毒(BCV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒、兔肠炎冠状病毒、北海鸥病病毒;第Ⅲ群:鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、兔冠状病毒、猴冠状病毒、豹冠状病毒、火鸡冠状病毒、人冠状病毒OC43(HCoV-OC43).
-
牛冠状病毒N基因的原核表达及初步应用
目的 获得牛冠状病毒N基因的全长序列,实现N基因在大肠杆菌中的高效表达,并进行初步应用.方法 根据已发表的牛冠状病毒Mebus株的序列设计引物,对BCV-DQ株进行RT-PCR扩增、克隆和测序;将该基因插入到原核表达载体pET-30a (+)上进行原核表达,SDS-PAGE 和Western blot检测;用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,建立ELISA检测方法,对部分临床样本进行检测.结果 BCV-DQ株N基因全长1 347bp,与GenBank已发表的6株BCV的N基因相比较,核苷酸同源性98.3%以上.构建的重组质粒pET-N能表达出一条大小约为60 ku的蛋白,且能与鼠抗BCV血清发生特异性反应.用建立的ELISA方法对黑龙江不同地区送检的共256份牛血清样品进行检测,结果阳性率65.23%,与病毒中和试验的符合率达95.31%.结论 BCV N基因保守性很高,并在原核表达系统中获得了高效表达,其表达产物具有良好的免疫反应原性.临床检测结果表明N蛋白可作为诊断抗原用于牛冠状病毒病的流行病学调查.
