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EGCG和PC-B2联合用药对AFB1致肝细胞损伤的保护作用及其机制
目的:探讨多酚类植物化学物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与原花青素B2(PC-B2),对黄曲霉素B1(AFB1)起的肝细胞损伤保护作用及机制.方法:选用人胚肝细胞(L-02细胞)进行体外实验研究,实验分为6组,分别为空白组,溶剂对照组,AFB1染毒组,AFB1染毒+EGCG组,AFB1染毒+PC-B2组和AFB1染毒+EGCG+ PC-B2组.采用MTT检测细胞存活度,通过单细胞凝胶电泳试验(SCGE)检测细胞DNA损伤,通过流式细胞法检测细胞凋亡,采用Western blot法检测凋亡信号通路相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Caspase-9,p53蛋白表达的水平.结果:EGCG与PC-B2均能降低AFB1所致L-02细胞的生长抑制,使AFB1对肝细胞的生长抑制率从61.12％降至42.18％和46.72％;EGCG与PC-B2联用则效果更佳.SCGE实验结果表明EGCG与PC-B2单用与联用均能减小AFB1引起的L-02细胞DNA损伤(P＜0.05).EGCG与PC-B2单用与联用均能显著降低AFB1所致L-02细胞的早期凋亡率(P＜0.05).Western blot实验结果表明,AFB1染毒后,EGCG和/或PC-B2处理均能显著降低Caspase-3,Caspase-9的表达(P＜0.01),提高Bcl-2/Bax比值,而对p53表达影响不明显.结论:EGCG与PC-B2通过降低L-02细胞DNA损伤与细胞凋亡率,从而降低AFB1对人肝细胞的损伤作用,其作用机制可能与下调Caspase-3,Caspase-9的表达,升高Bcl-2/Bax有关.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 原花青素B2 对黄曲霉素B1 DNA损伤 细胞凋亡
