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小鼠骨髓源性树突细胞的体外优化培养及其生物学特性鉴定
目的 对小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)的体外培养方法进行优化.方法 从小鼠获取骨髓细胞,用含因子的完全培养基于37 ℃5% CO2培养箱中培养,3 h后弃去上清,加入相同因子浓度的完全培养基继续培养,48 h收集上清细胞离心后种于6孔板中以上培养基继续培养,96 h后换液处理,第8天时添加LPS刺激作为LPS刺激组,未添加LPS作为对照组,结合流式细胞仪(FCM)、酶联免疫吸附技术(ELISA)等从细胞形态、表面分子[B7-2分子(CD86)]及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的特异性表达、相关因子[白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)]分泌及诱导T淋巴细胞的增殖能力等进行鉴定.结果 镜下观察细胞有明显的不规则枝状突起,有典型DCs形态特征.流式结果显示细胞纯度为77.4%左右;经LPS刺激后树突细胞CD86、MHCⅡ的比例均明显增加(P<0.001);ELISA结果显示与对照组相比,LPS刺激组IL-12、IL-10的含量明显增加(P<0.01),IL-12的表达量增加约18倍,IL-10的表达量增加约2倍.MLR混合淋巴细胞反应结果显示经LPS刺激后LPS刺激组细胞诱导T淋巴增殖能力显著增强(P<0.05).结论 树突细胞体外原代培养48 h后,选用上清细胞继续培养可以获得纯度较高性能较好的DCs.
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精子的体外优化技术
目的为临床精子的体外优化提供一种切实有效选择.方法将近年来的精子优化技术加以综合分析.结果临床上见到各种精液原因引起的不育如少精子、精子活力低下、畸形精子、精液液化不良等,针对这些原因有着不同的优化方法,各种优化方法有着优点和缺点,有时需要2种或2种以上的方法综合使用,才能达到更好的效果.结论在临床优化技术的选择上一定要根据病人的具体情况,选择一种或两种或两种以上的优化方法,使优化效果更好,又能减轻病人的经济负担.
